рівняння. Платівку поміщають в камеру з сумішшю розчинників розчин аміаку концентрований P1 - метанол Р (1: 99). Коли фронт розчинників пройде 15 см від лінії старту, пластинку виймають з камери, сушать на повітрі і переглядають в УФ-світлі при довжині хвилі 254 нм.
На хроматограмі випробуваного розчину має виявлятися основна пляма на рівні основної плями на хромaтoгpaмме розчину порівняння, відповідне їй за розміром.
Випробування на чистоту
Розчин S. 0.10 г субстанції розчиняють у воді P і доводять об'єм розчину тим самим розчинником до 10 мл.
Прозорість розчину. Розчин S повинні бути прозорим.
Кольоровість розчину. Забарвлення розчину S повинні бути не інтенсивніше, ніж еталон 6 шкали найбільш відповідного кольору.
Оптичне обертання . Від +0.10 ° до - 0.10 °, у перерахунку на суху речовину. Визначення проводять для розчину S.
Cопутствующие домішки . Визначення проводять методом рідинної хроматографії.
Випробуваний розчин (а) .5 0,0 мг субстанції розчиняють у 20 мл рухомої фази і доводять об'єм розчину рухомою фазою до 25,0 мл.
Випробуваний розчин (b) .5 0,0 мг субстанції розчиняють у 0,1 мл диметилсульфоксиду Р, якщо необхідно, злегка нагріваючи у водяній бані протягом декількох секунд, і доводять об'єм розчину рухомою фазою до 25,0 мл.
Розчин порівняння (а) .0 , 5 мл випробуваного розчину (а) доводять рухомою фазою до об'єму 100,0 мл.
Розчин порівняння (b) .5 0,0 мг ФСЗ атенололу для валідації колонки розчиняють в 0,1 мл диметилсульфоксиду Р , якщо необхідно, злегка нагріваючи в водяній бані протягом декількох секунд, і доводять об'єм розчину рухомою фазою до 25,0 мл.
хроматографування проводять на рідинному хроматографі з УФ-детектором за таких умов:
a) колонка з нержавіючої сталі розміром 0,15 м * 4,6 мм, заповнена силікагелем для хроматографії октадецілсілільним P з розміром частинок 5 мкм;
b) рухома фаза: 1,0 г натрію октансульфонamа Р і 0,4 г тетрабутіламонія гіхдросульфата Р розчиняють в 1 л cмеси тетрагидрофуран Р - метанол Р - розчин 3,4 г / л калію дігидрофосфата Р ( 20: 180: 800) і доводять рН кислотою ортофосфорної Р до 3,0 ;) швидкість рухомої фази 1,0 мл / хв ;) детектонірованіе при довжині хвилі 226 нм.
Врівноважують колонку при швидкості рухомої фази 1.0 мл / хв на протязі близько 30 хв.
Хроматографірують 10 мкл розчину порівняння (а). Чутливість системи регулюють таким чином, щоб висота основного піку становила не менше 50% шкали реєструється пристрою.
Хроматографірують 10 мкл розчину порівняння (b). Отримана хроматограмма повинна бути аналогічною до зразка хроматограми, що додається до ФСЗ атенололу для валідaці колонки: пік біс-ефіру виходить першим і відокремлюється від піку третинного аміну, який зазвичай виходить піком з двома максимумами. Якщо необхідно, регулюють вміст натрію октансульфоната в рухомій фазі. Збільшення вмісту натрію октансульфоната збільшує час утримання третинного аміну. ??
Поперемінно хроматографірують 10 мкл випробуваного розчину (a) і 10 мкл розчину порівняння (а). Час хроматографування має бути в 4 рази більше часу утримання основного піку. На хроматограмі випробуваного розчину (а) площа будь-якого піка, крім основного, не повин...
