сполук, що заважають флюорометріческіе визначенням, кількісному перекладі в лужному середовищі тіаміну в тіохром, екстракції тіохрома і вимірі інтенсивності флюоресценції тіохрома у порівнянні зі стандартним розчином за допомогою флюорометра.
Відбір проб борошна - за ГОСТ 27668.
Апаратура, матеріали та реактиви - за ГОСТ 29138-91.
Підготовка до випробування.
Приготування основного стандартного розчину тіаміну: наважку тіаміну хлориду масою 0, 126 г (дана навіс тіаміну хлориду відповідає 0,100 г основного біологічно активної речовини (тіаміну)) завадять у мірну колбу місткістю 1000, доводять об'єм дистильованою водою до мітки, ретельно перемішують, переносять в склянку з темного скла з притертою пробкою і додають 0,5 толуолу.
Концентрація основного стандартного розчину тіаміну складе 100 мкг /.
Розчин зберігають в холодильнику не більше 2 міс.
Приготування робочого стандартного розчину тіаміну: 3-5 основного стандартного розчину тіаміну поміщають в хімічний стакан і витримують до придбання розчином кімнатної температури.
Потім 1 основного стандартного розчину тіаміну, відібраного піпеткою місткістю 1, переносять у мірну колбу місткістю 500, доводять об'єм дистильованою водою до мітки і ретельно перемішують.
Концентрація робочого стандартного розчину тіаміну складе 0,2 мкг /.
Розчин готують в день проведення аналізу.
Приготування окисної суміші: до 2 розчину железосинеродистого калію концентрації 0,01 г/додають 10 розчину гідроксиду натрію концентрації 0,3 г/і ретельно перемішують. Суміш придатна до вживання протягом 2-3 ч.
Очищення бутилового і изобутилового спиртів: перед проведенням аналізу вимірюють флюоресценцію використовуваних спиртів у порівнянні з дистильованою водою. За наявності флюоресценції спирт очищають. Для цього до 1 спирту додають наважку активного вугілля масою від 15 до 20 г, струшують протягом 30 хв на змішувачі-гойдалці, залишають на добу, потім декантирують, фільтрують і переганяють на гліцеринової або піщаній бані при температурі 117 В° С (бутанол) і 108 В° С (ізобутанол). Після очищення перевіряють відсутність флюоресценції спирту в порівнянні з дистильованою водою. p> Проведення випробування
Тіамін визначають у двох паралельних наважках продукту.
Гідроліз: наважку продукту масою 10,0 г завадять в колбу місткістю 250 і доливають 150 розчину соляної кислоти концентрації 0,1 моль /.
Гідроліз здійснюють на киплячій водяній бані протягом 40 хв, закривши горло колби воронкою діаметром 35 мм.
Вміст колби слід періодично перемішувати, особливо в перші 5 хв.
По закінченні гідролізу колбу охолоджують до кімнатної температури і за допомогою насиченого водного розчину оцтовокислого натрію доводять рН гідролізату до 4,5 В± 0,1 (потенціометрично).
Після цього до гідролізату додають наважку Амілорізін масою 0,10 г, ...
