икористано для визначення розмірів клітини. На основі даного параметра можна відрізнити життєздатні ядерні клітини від мертвих і еритроцитів. Розсіювання світла під кутом 90 градусів дозволяє судити про співвідношення розмірів ядра і цитоплазми і наявності гранул в клітині. Отримані характеристики дозволяють розділити аналізовані лейкоцити на лімфоцити, моноцити, нейтрофіли.
Одночасно можна проводити аналіз поверхневих і внутрішньоклітинних антигенів клітин за допомогою моноклональних антитіл до них, кон'югованих з різними флуоресцентними мітками. Якщо аналізована клітина містить флуорохром, то він випускає випромінювання відповідних параметрів, при цьому інтенсивність флуоресценції корелює щільністю антигену на клітинній поверхні, а рівень флуоресценції вимірюється за допомогою ФЕУ.
У практиці широко використовуються два флуоресцентних барвника - флуоресцеїн - 5-ізотіоціонат (ФИТЦ) і R-фікоеритрин (ФЕ). Вони збуджуються аргоновим лазером і довжиною хвилі 488 нм і випромінюють флуоресценцію в різних діапазонах хвиль: ФИТЦ випромінює світло в зеленому спектрі, а ФЕ - в оранжево-червоному. Барвники розрізняються як по специфічності їх молекулярного зв'язування, так і по оптичним характеристикам, таким як спектр поглинання, збудження флуоресценції та ін. В даний час спектр використовуваних флуорохромов розширився. Основні використовувані флуорохроми: Alexa Fluor 405, Pacific Blue, AmCyan, Alexa Fluor 488, FITC, PE, PE-Texas Red, Texas Red, APC, Alexa Fluor 647 та ін. А також флуорохроми, що зв'язуються з ДНК: Бромістний етидієм, Пропідіум йодид.
Порівняльна характеристика приладів для проточної цитометрії
Проточний цитофлуориметр СYTOMICS FC 500 Проточний цитофлуориметр CELL LAB QUANTA SC Проточний цитофлуориметр CyAn ADP Проточний цитофлуориметр GALLIOS Джерело збудження Лазери: Однофазний аргоновий, 488 нм, вихідна потужність 20 мВт Однофазний червоний доданий, 638 нм, вихідна потужність 22 мВт -синього лазер (488 нм) меркуріевая лампа дугового розряду. (За допомогою фільтрів з її спектра виділяються фіолетові (405 і 435 нм) і УФ (366 нм) лінії.) Твердотільний лазер 405 нм, 50 мВт (CyAn ADP 9 color); Твердотільний лазер 488 нм, 25 мВт; Діодний лазер 642 нм, 60 мВт-Синій напівпровідниковий діодний лазер, 488 нм, 22 мВт -Червоний напівпровідниковий діодний лазер, 638 нм, 25 мВт фіолетовий напівпровідниковий діодний лазер, 405 нм, 40 мВт (опція) Чутливість і дозвіл Визначає частинки діаметром від 0,5 мкм до 40 мкм від 3 до 40 мкм Чутливість MESF FITC lt; 100, MESF РЕ lt; 500,404 мкм - 40 мкм Розмір проточною кювети Прямокутний канал BioSense 150 x 450 мкм Стандартна трикутна проточна осередок 125 мкмІз кварцового скла, з 250 мкм внутрішнім каналом квадратного сеченіяПрямоугольная кварцова, 150 * 460 мкм < b align="justify"> Швидкість аналізу 3300 подій/секДо 10000 подій в секундуДо 70000 подій в секундуДо 10000 подій в секунду Швидкість струму Швидкість потоку (низька, середня, висока) задається операторомСкорость потоку проби (в базовому варіанті) 4,17-100 мкл/хв До 150 мкл/хв (2,5 мкл/с) Швидкість потоку (низька, середня, висока) задається оператором Детектори -детектор светорассеяния в прямому напрямку - запатентований напівпровідниковий детектор на основі моделі Фур'є Детектор бічного світлорозсіювання - високоефективний світлодіод Детектори флуоресценції - високоефективні фотопомножувачі зі спектральною чутливістю від 185 до 900 нм3 високочутливих широкосмугових фотоумножителя-Детектор светорассеивания в прямому напрямку -детектор светорассеивания в бічному напрямку -детектор флуоресценції (7) - Детектор светорассеивания в прямому напрямку -детектор светорассеивания в бічному напрямку -детектор флуоресценції
Діагностичні набори для проточної цитометрії
Набір APOPTEST-FITC для визначення апоптозу. Виробництво - Dako.
Набір APOPTEST-FITC включає кон'югований з флуоресцентною міткою аннексін V і барвник - йодид пропідія, таким чином можна розділити апоптозние, життєздатні і некротизовані клітини.
Набір MACSPlex для визначення 12 цитокінів людини. Виробництво - Miltenyi Biotec.
До складу набору входять 12 популяцій мікросфер, покритих іммобілізованими антитілами, специфічними до наступним цитокинам: GM-CSF, IFN-?, IFN- ?, IL - 2, IL - 4, IL - 5, IL- 6, IL - 9, IL - 10, IL - 12p70, IL - 17A і TNF-?.
Набір QIFIKIT для кількісного визначення антигенів на клітинній поверхні.
