ктивність поділу. Для цього в руках хроматографіста знаходяться три дуже важливих чинники: вибір хімічної природи сорбенту, вибір складу розчинника і його модифікаторів і облік хімічної структури і властивостей поділюваних компонентів. Іноді помітний вплив на селективність надає зміна температури колонки, що міняє коефіцієнти розподілу речовин між рухомою і нерухомою фазами.
При розгляді поділу двох компонентів на хроматограмі і його оцінкою важливим параметром є дозвіл Rs, яке пов'язує часи виходу і ширину піків обох поділюваних компонентів (рис. 1.3):
R S = 2 (t R 2 - t R 1 )/(W 1 + W 2 )
Дозвіл як параметр, що характеризує поділ піків, збільшується в міру зростання селективності, що відображається зростанням чисельника, і зростання ефективності, відображеної зниженням значення знаменника через зменшення ширини піків. Тому швидке прогрес рідинної хроматографії привів до зміни поняття В«рідинна хроматографія високого тиску В»- воно було замінено наВ« рідинну хроматографію високого дозволу В»(при цьому скорочений запис терміна на англійською мовою збереглася HPLC як найбільш правильно характеризує напрямок розвитку сучасної рідинної хроматографії). Скорочення, прийняте у вітчизняній літературі, - ВЕРХ, розшифровується як В«високоеффектіная рідинна хроматографіяВ», для сучасної рідинної хроматографії дещо менш вдало, оскільки не враховується найважливіший фактор поділу - селективність.
В
Рис. 1.2. Дозвіл піків і параметри утримування
Важливим параметром утримування в рідинної хроматографії є ​​коефіцієнт ємності k ', визначається як частка від ділення маси речовини в нерухомій фазі на масу речовини в рухомій фазі:
k '= m н /m п
Важливе рівняння в рідинної хроматографії, зв'язує основні хроматографічні параметри поділу наступне:
RS = С? [(a-1)/a] [k 2 '/ (1 + k 2 ')] VN 2
Дозвіл, таким чином, визначається добутком трехсомножітелей, перший з яких висловлює залежність від селективності колонки, другий - від коефіцієнта ємності колонки і третій - від ефективності колонки (ЧТТ).
Розглянемо це найважливіше рівняння більш докладно. Якщо, О± = 1, то дозвіл дорівнює 0, тобто поділу немає незалежна від числа теоретичних тарілок в колонці. Однак з характеру функції О± в рівнянні видно, що невеликі зміни можуть привести до помітного збільшення дозволу, особливо для тих випадків, коли значення О± близькі до 1. Якщо за рахунок підбору умов поділу вдається змінити О± з 1,1 до 1,2, це призводить до поліпшення дозволу в два рази. Таким чином, на фактор селективності слід звертати основну увагу при підборі умов поділу, враховуючи відмінність у взаємодії поділюваних компонентів як у нерухомою, так і в рухомій фазі. На відміну від газової хроматографії, в якої взаємодії в рухомого (газової) фазі незначні і селективність системи в основному визначається тільки взаємодіями речовин з нерухомою фазою, в рідинної хроматографії рухлива (рідка) фаза не є інертною, а може відігравати головну роль у процесі термодинамічної розподілу між нерухомої і рухомої фазами внаслідок селективного взаємодії поділюваних речовин з рухомою фазою. Тому у виборі умов для високоселективного поділу як вибір сорбенту, так і вибір розчинника відіграють однаково важливу роль, а мистецтво хроматографіста в ВЕРХ більш багатогранно і вимагає врахування більшого числа взаємодій між молекулами, ніж у ГХ.
Другий співмножник в рівнянні приймає значення, рівне 0 (при цьому дозвіл також дорівнює 0, тобто поділ відсутній) в тому випадку, коли коефіцієнт ємності для другого компонента дорівнює 0, тобто обидва поділюваних компонента елюіруются як несорбіруемие речовини (Взаємодія з нерухомою фазою відсутня). З зростанням значення k ' дозвіл збільшується, при цьому швидкість аналізу падає.
Нарешті, з третього множники видно, що досягається дозвіл пропорційно кореню квадратному з числа теоретичних тарілок, тобто для збільшення дозволу вдвічі потрібно збільшити ефективність колонки в 4 рази (наприклад, використовувати колонку в 4 рази довше). Подовження колонки в 4 рази призводить до збільшення тривалості аналізу також вчетверо, тобто швидкість аналізу падає. Як правило, якщо ефективність колонки недостатня, а швидкість аналізу є важливим чинником, йдуть по іншому шляху для підвищення ефективності - використовують колонку з більш дрібним по зернения сорбентом. Однак у цьому випадку платою за більшу ефективність при тій же швидкості аналізу є підвищення тиску на колонці.
Слід зазначити, що, хоча з рівняння і очевидно, що ефективність колонки менше впливає на дозвіл, ніж її селективність і коефіцієнт ємності, так як дозвіл пропорційно кореню квадратному з ефективності, проте підвищенню ефективності колонок надаєт...
