> 2 ТАФП був отриманий з аналізу спектрів поглинання ряду розчинів з різним співвідношенням димер: мономер, в яких досліджували взаємозв'язок коефіцієнта екстинкції і полушіріни смуги Сорі. За коефіцієнт екстинкції дімерная порфірину в розрахунку на мономер було прийнято значення, при якому зі збільшенням кількості димерів в розчині відносне уширение смуги Сорі НЕ супроводжувалося зміною коефіцієнта екстинкції.
Спектри поглинання знімали на спектрофотометрі В«Specord М-40 В»(НДР). Вимірювання рН проводили за допомогою універсального іономіра ЕВ-74. p> Реакції протонування і депротонування Н 2 ТАФП в розчинах відбуваються шляхом послідовного приєднання або видалення протонів від центральних атомів азоту порфіринового кільця. Рівновага цих реакцій вивчали методом спектрофотометричного титрування на двох зразках
В
При титруванні водного розчину Н 2 ТАФП - ПМАК з кислої області розчином КОН в спектрі порфірину спостерігається зниження інтенсивності смуг поглинання з О» макс = 445 та 654 нм. Одночасно зростає інтенсивність смуги з О» макс = 420 нм (рис. 1). Спектральні зміни супроводжуються появою чотирьох ізобестіческіх точок при довжинах хвиль 426, 464, 579 і 698 нм, що свідчать про те, що зі збільшенням рН в системі відбувається зміна концентрацій двох типів поглинаючих центрів, якими є протоновану і непротонірованная форми Н, ТАФП. Спектр депротонованої порфірину по характеристикам відповідає спектру мономера. Використовуючи ефективний коефіцієнт екстинкції протонірованнной форми порфірину (е еф = 0,44-10 5 л/моль-см) при Х = 654 нм, який визначали в області рН ~ 3, де порфірин повністю протоновану, оскільки зниження рН не приводило до зміни спектру, отримали залежність концентрації протоновану форми порфірину від рН (рис. 2). Наявність двох S-образних переходів на кривій дозволяє встановити дві константи рівноваги, які визначали в точках, коли ступінь дисоціації а титр системи дорівнює 0,5, використовуючи при цьому рівняння Гендерсона - Хассельбаха
pK = pH + lg
Знайдені значення констант дорівнюють рК, 5,6 і рК 2 7,9. Як видно з рис. 2, при низьких рН відтитровують тільки 8% молекул порфірину. Процес депротонування цих молекул відбувається в області рН 4,5 - 5,7, тобто там, де відтитровують від 10 до 22% ПМАК (рис. 2, крівая2). Це область рН, коли в ПМАК здійснюється конформаційний перехід. Макромолекули з стабілізованою водневими зв'язками і гідрофобними взаємодіями ланцюгів вторинної конформацін переходять в конформацію асиметричних пухких негативно заряджених клубків. Інша частина порфірину титрується, вже перебуваючи в полі негативно зарядженого Поліаніонна. В результаті збільшується рК а дисоціації протоновану порфірину більш ніж на дві одиниці рН, до 7,9, оскільки, для того щоб вивести протони з клуб...
