Теми рефератів
> Реферати > Курсові роботи > Звіти з практики > Курсові проекти > Питання та відповіді > Ессе > Доклади > Учбові матеріали > Контрольні роботи > Методички > Лекції > Твори > Підручники > Статті Контакти
Реферати, твори, дипломи, практика » Курсовые обзорные » Придушення експресії гена EGFP в клітинах з використанням кон'югатів олігонуклеотиду з піреном

Реферат Придушення експресії гена EGFP в клітинах з використанням кон'югатів олігонуклеотиду з піреном





ології. Принцип антисенс-технології просто: антисмислового олігорібонуклеотіди викликають придушення експресії гена-мішені сиквенс-специфічним чином, використовуючи здатність олигонуклеотидов гібрідізоваться з мРНК-мішенню допомогою Уотсон-Криковських взаємодій. Олигонуклеотид, зв'язуючись з РНК-мішенню, перешкоджає її подальшому процесингу [1-3]. Експерименти на клітинних культурах показали, що використання олігодезоксірібонуклеотідов (далі ODN) довжиною 20 - 30 н., Компліментарних ділянці мРНК значно знижує рівень експресії кодованого нею білка. Розвиток методу показало ряд причин, що призводять до зниження ефективності ODN: короткий час життя ODN в сироватці, низька ефективність проникнення (транспорту) в клітку і недостатня ефективність зв'язування зі структурованими фрагментами РНК. p align="justify"> Розвиток органічної хімії, зокрема, хімії нуклеїнових кислот, дозволяє шукати шляхи вирішення виникаючих проблем внесенням різних хімічних модифікацій ODN. Хімічної модифікації можуть піддаватися як азотисті основи, так і цукрово-фосфатний остов, що призводить до підвищення його нуклеазоустойчівості ODN та ефективності його зв'язування з комплементарної послідовністю. Підвищення ефективності доставки ODN в клітку намагаються вирішити введенням до її складу за одного з кінців різних груп, що полегшують проходження через мембрану [1,3]. p align="justify"> В основному виділяють два механізми дії антисмислових олигонуклеотидов: арешт трансляції за рахунок зв'язування регуляторної області і розщеплення РНК у складі РНК-ДНК-гетеродуплекса. Ведення модифікацій може різне вплив з того чи іншого механізму, що слід враховувати при виборі варіанту модифікації [1,3,4]. br/>

1.1 Механізм дії антисмислових олигонуклеотидов


При взаємодії антисмислового олігонуклеотиду з мРНК відбуваються дві події: стерическое блокування і розщеплення мРНК-мішені РНКази H. Для одних олигонуклеотидов відбуваються обидві події (РНКаза H-компетентні олігонуклеотиди), для інших - тільки стерическое блокування (РНКаза H-незалежні). Ці два варіанти засновані на різних клітинних механізмах. Найбільш широкий спектр молекулярних механізмів витрачається при використанні другого варіанту. Це досягається адресацією олігонуклеотидів до певних регуляторним послідовностям, як у пре-мРНК, так і в мРНК. У разі пре-мРНК адресація ODN до граничної області між Інтроном і екзонах порушує сплайсинг, що призводить або до його зупинки, або до утворення мРНК, що кодує нефункціональний білок (див. рис.1). Іншим перспективним ділянкою зв'язування ODN в пре-мРНК є 5 -кінцевий регіон. Взаємодія ODN з цим регіоном призводить до блокування кепірованія [2,4,5].

При взаємодії ODN з мРНК відбувається порушення її трансляції, а отже і синтезу білка за рахунок блокування руху рибосоми по мРНК або навіть її складання в залежності від положення сайту зв'язування ...


Назад | сторінка 2 з 24 | Наступна сторінка





Схожі реферати:

  • Реферат на тему: Оптимізація методу придушення експресії гена EGFP З використанням кон'ю ...
  • Реферат на тему: Характеристика процесу альтернативного сплайсингу МРНК еукаріот
  • Реферат на тему: Реакція зв'язування комплементу (РСК) і реакція тривалого зв'язуван ...
  • Реферат на тему: Фінансовий механізм управління діяльністю підприємства та шляхи підвищення ...
  • Реферат на тему: Фактори, що впливають на ефективність роботи груп. Шляхи підвищення ефекти ...