Ф);
25 об.% Ацетону в гексані (НФ). Швидкість елюенту - мл / хв.
У роботі використовували ацетон, 1-бутанол, ацетонітрил, гексан кваліфікації
ч. або ч.д.а. для екстракції і для ВЕРХ визначень.
Для дослідження накопичення ксантофиллов при введенні як підгодівлі ксантофилл містить концентрату (ORO GLO 20 DRY, Kemin Europa NV, Belgium) було вибрано приватне господарство, вихідна продукція якого відрізнялася в кращий бік (~ 40 мкг лютеїну і зеаксантину на 1 г) в порівнянні з продукцією птахофабрик та багатьох приватних господарств.
Результати та обговорення
Для оцінки накопичення каротиноїдів часто застосовують різні колірні шкали (найбільш поширеною з яких є віяло Рош [3 - 6]). Незважаючи на очевидну простоту візуального зіставлення забарвлення, залишається багато питань, на які неможливо отримати відповіді. Так, добре відомо, що в жовтку може накопичуватися ряд речовин (апо-каротеналь або апо-етиловий ефір каротинової кислоти [7]), надаючи продукту швидше естетичну цінність. У плані визначення співвідношення між ксантофилла не надто інформативні спектрофотометричні методи, оскільки спектри лютеїну і зеаксантину досить близькі, і практично марно використання колірних шкал.
Пелюстки квіток чорнобривців (Tagetes sp.) Містять в основному діефіри лютеїну і зеаксантину [8]. З використанням обернено-фазової ВЕРХ, екстрактів пелюсток квіток цієї рослини і їх часткових гідролізатів [8] в якості стандартів нами було встановлено, що більш ніж в 50 досліджених зразках жовтків практично були відсутні (не більше 0,5% від суми каротиноїдів) діефіри лютеїну і зеаксантина; зміст моноефіри і Р-каротину не перевищувало 2,0% і 2,5% відповідно. При цьому виникає питання про доцільність часто використовуваного омилення на попередньому етапі визначення [9, 10], тим більше, що будь-які маніпуляції з каротиноїдами слід проводити з урахуванням високої лабільності цих сполук.
Найбільш інформативна при дослідженні каротиноїдів жовтка яєць нормально-фазова ВЕРХ. Аналізуючи хроматограми екстрактів жовтка (рис. 1), можна зробити висновок про те, що крім лютеїну і зеаксантину в жовтках досить помітно присутність інших речовин (до 25% по площах піків), що відносяться до изомерам цих ксантофиллов і їх метаболитам [11, 12] . Співвідношення лютеїн: зеаксантин варьировало в значних межах, але найбільш характерним є співвідношення ~ 4:1.
Відзначимо, що поділ та кількісне визначення лютеїну і зеаксантину можливо і при використанні обернено-фазової ВЕРХ (у рухливих фазах, збагачених ацетонітрилом). Але метод може бути використаний тільки після відділення жирів (або омилення), екстрагуються разом з каротиноїдами, оскільки при високому вмісті ацетонітрилу в ацетоні жири випадають в осад, сорбируясь значну частину каротиноїдів.
Рис.1. Поділ каротиноїдів екстракту жовтка курячих яєць.
Умови: колонка 250x4, 6 мм ZorbaxSil (5 мкм); рухома фаза: 25% ацетону в гексані,
1 мл / хв; детектор: 436 нм. Екстракти: з жовтків яєць 1 - експериментальних; 2 - птахофабрики «Травн...
