жуть виглядати темними на світлому фоні (позитивний фазовий контраст) або світлими на темному фоні (негативний фазовий контраст).
. 4 Метод інтерференційного контрасту (інтерференційна мікроскопія)
Метод інтерференційного контрасту схожий з попереднім - вони обидва засновані на інтерференції променів, що пройшли через мікрочастку і миновавших її. Пучок паралельних світлових променів від освітлювача роздвоюється на два потоки, входячи в мікроскоп. Один з отриманих променів прямує крізь спостережувану частку і набуває зміни у фазі коливання, інший - повз минаючи об'єкт за тією ж або додаткової оптичної гілки мікроскопа. В окулярній частини мікроскопа обидва променя знов з'єднуються і інтерферують між собою. У результаті інтерференції буде будуватися зображення, на якому ділянки клітини, що володіють різною товщиною або різною щільністю, будуть відрізнятися один від одного за ступенем контрастності. Метод інтерференційного контрасту часто застосовують спільно з іншими методами мікроскопії, зокрема із спостереженням в поляризованому світлі. Його застосування в поєднанні з мікроскопією в ультрафіолетових променях дозволяє, наприклад, визначити вміст нуклеїнових кислот в загальній сухій масі об'єкта.
. 5 Поляризаційна мікроскопія
Поляризаційна мікроскопія - це метод спостереження в поляризованому світлі за об'єктами, що володіють изотропией, тобто впорядкованої орієнтацією субмикроскопических частинок. Перед конденсором поляризаційного мікроскопа поміщається поляризатор, який пропускає світлові хвилі з певною площиною поляризації. Після препарату і об'єктиву поміщається аналізатор, який може пропускати світло з цією ж площиною поляризації. Якщо аналізатор повернути потім на 90о по відношенню до першої, то світло проходити не буде. У тому випадку, коли між такими схрещеними призмами буде знаходитися об'єкт, що володіє здатністю поляризувати світло, він буде видно як світиться на темному полі. За допомогою поляризаційного мікроскопа можна переконатися, наприклад, в орієнтованому розташуванні мицелл в клітинній стінці рослин.
. 6 Вітальне вивчення клітин
Методи світлової мікроскопії дають нам можливість спостерігати живі клітини. Для короткого спостереження клітини зазвичай поміщають в рідку середу на предметне скло. Але для більш тривалого часу потрібні інші способи. Часто для тривалого спостереження використовують спеціальні камери (плоскі флакони з отворами, закритими тонкими стеклами, або розбірні плоскі камери). Клітини вивчають у спеціально підібраних для них середовищах. Зазвичай для найпростіших це збалансовані сольові розчини з добавками мікроорганізмів та інших найпростіших, службовців для об'єкта вивчення їжею. Вільні клітини багатоклітинних можуть вивчатися в плазмі крові або в спеціальних синтетичних середовищах. Для вивчення клітин і тканин тварин використовують метод клітинних культур.
. 6.1 Метод клітинних культур
Культивування клітин являє собою процес, за допомогою якого in vitro окремі клітини (або єдина клітина) штучно вирощуються в контрольованих умовах для подальшого вивчення. Простіший варіант цього методу являє собою те, що в камеру з живильним розчином поміщається невеликий шматочок живої тканини і через деякий час по периферії починає йти зростання і ділення клітин. Другий спосіб отримання культури клітин це обробка шматочка тканини трипсином або хелатоном (що призведе до дисоціації клітин), а потім приміщення в посудину з живильним екстрактом, де, після опущення клітин на дно і їх прикріплення, починається ріст і розмноження культури. Для культури клітин воліють використовувати ембріональний матеріал, який має більшу здатність до поділу ніж дорослий. При культурі клітин слід дотримуватися спеціальні умови стерильності, температурного режиму, pH. Таким же методом можна культивувати клітини рослинного походження. Для цього їх обробляють ферментами, розчинювальними клітинні оболонки, а відокремилося вміст поміщають у спеціальне середовище, де відбувається їх зростання і ділення. Разом з культивуванням клітин зазвичай використовують мікрокінозйомок і Мікрофотос'емку, за допомогою якої реєструються багато клітинні процеси.
. 6.2 Метод мікрохірургії
Метод мікрохірургії застосовується для дослідження живих клітин. Це метод оперативного втручання та впливу на клітку, в т.ч. видалення або вживлення окремих органел. Цей метод також передбачає пересадку органел з клітки в клітку, введення великих макромолекул в клітку. Зазвичай мікроманіпулятор поєднується з мікроскопом, який служить для спостереження за ходом оперативного втручання. Мікрохірургічними інструментами є скляні гачки, голки, капіляри, які виготовляються на мікрокузніцах raquo ;. При мікроопе...
