не більше 1 години).
Дослідження нативних препаратів проводять під мікроскопом з природним або штучним освітленням негайно після його приготування при загальному збільшенні 280 - 400 раз (об'єктив 40, окуляр 7 або 10). Піхвова трихомонада визначається за грушоподібної, округлої або овальної форми тіла за розмірами близьким до лейкоцитів. Вона має характерні толчкообразние руху ундулирующей мембрани і джгутиків, які особливо добре видно при дослідженні в мікроскопі з темнопольним або фазовоконтрастной конденсором. Трихомонади здійснюють активні рухи поступального і обертального характеру.
При дослідженні нативних препаратів вагінальні трихомонади важко відрізняються від джгутикових сімейства бодонідов, які можуть бути занесені до препарат з води, забрудненого посуду і т.д. На відміну від трихомонад, бодоніди мають 2 джгутики і швидко рухаються по прямій. До помилок може призвести наявність у препараті рухливих бактерій, які, прикріплюючись до лейкоцитів, створюють враження великої кількості рухливих трихомонад.
Метод нативних препаратів високо специфічний. Однак виявити в них вагінальні трихомонади можна лише за наявності життєздатного збудника з активною рухливістю, що досягається технічно правильним взяттям матеріалу і своєчасним його переглядом. Чутливість методу знижена при безсимптомному перебігу захворювання. Змінені форми трихомонад, нерухомі особини рідко виявляються даним методом.
Мікроскопія забарвлених препаратів
Для виявлення піхвових трихомонад мазки з матеріалом після фіксації можливо фарбувати різними способами, як простими - фарбування одним барвником, так і складними - фарбування кількома барвниками. Після фарбування мазки мікроскопіруют з використанням імерсійної системи мікроскопа і загальним збільшенням 500 - 1000 разів. Матеріал беруть з вогнищ ураження за допомогою стерильного зонда і наносять на чисте знежирене предметне скло рівномірним тонким шаром. Після висушування на повітрі, препарати фіксують у протягом 3 - 5 хвилин в метиловий спирт, або етиловому 96% спирті, або в суміші Никифорова. Найбільш часто використовують такі способи забарвлення:
1. Фарбування за Романовським-Гімзою. Фіксований препарат поміщають в робочий розчин фарби (вихідний розчин фарби розведений дистильованою водою у співвідношенні 1:10) на 25 - 60 хвилин, потім його промивають водою, висушують і мікроскопіруют з використанням імерсійної системи. Ядра трихомонад забарвлюються у фіолетовий або фіолетово-рубіновий колір, протоплазма - у блакитний, блефаропласт, джгутики, аксостіль і хроматіновие зерна протоплазми забарвлюються в рожевий або червоний колір;
2. Фарбування 1% водним розчином метиленового синього (1 г метиленового синього розчиняють в 100 мл дистильованої води, фільтрують через паперовий фільтр). На препарат наносять 1% розчин метиленового синього на 1 хвилину, потім ретельно змивають залишився барвник під струменем холодної води, висушують і мікроскопіруют. Препарат синього кольору. Бактеріальна флора профарбовується в синій колір різної інтенсивності. Вагінальні трихомонади різної форми розташовані в слизу, між клітинними елементами - чітко проглядається оболонка, ядро ​​розташоване ексцентрично, інтенсивно забарвлене в синій колір, протоплазма ніжна, сітчаста, світло-синя, вакуолі безбарвні.
3. Фарбування 0.5% розчином діамантового зеленого (0.5 г діамантового зеленого розчиняють в 100 мл киплячої дистильованої води, фільтрують у гарячому вигляді через паперовий фільтр). На препарат наносять 0.5% водний розчин діамантового зеленого на 1 хвилину, потім ретельно змивають барвник під струменем холодної водопровідної води, висушують і мікроскопують. Препарат зеленого кольору - ядра клітин пофарбовані в зелений колір, протоплазма - у світло-синій. Слиз зеленого кольору. Бактеріальна флора забарвлюється в зелений колір різної інтенсивності. Вагінальні трихомонади розрізняють різної форми, вони розташовані між клітинними елементами в слизу, чітко проглядається оболонка, ядро ​​інтенсивно забарвлене в зелений колір, розташоване ексцентрично, протоплазма сітчаста, світло-зеленого кольору, вакуолі безбарвні.
4. Фарбування за модифікованим способом Грама. Метод заснований на властивості вагінальних трихомонад та інших грамнегативних мікроорганізмів при знебарвленні їх певний час в етиловому спирті, віддавати основний фіолетовий барвник і дофарбовував, надалі, додатковим оранжево-червоним.
Реактиви:
- 1% водний розчин крісталлвіолета (1 г крісталлвіолета розчиняють в 100 мл киплячої дистильованої води, розчин фільтрують в гарячому вигляді через паперовий фільтр),
- водний люголевскім розчин (2 г йодистого калію розчиняють в 300 мл дистильованої води, в отриманому розчині розчиняють 1 г чистого йоду, фільтрують через паперовий фільтр;
- 96% етиловий спирт;
- 1% водний розчин нейтрального червоного (1 г нейтрального червоного розчиняють у 100 мл дисти...
