39;язує VIIa-TF, вимикаючи зовнішній шлях. В експерименті, коли в систему очищених білків-прокоагулянтів системи згортання додається TFPI, зміна в кінетиці системи було дуже сильно (Мал. 4). Однак, спроби змоделювати ці результати за допомогою математичної моделі, що використовує описаний вище механізм дії, не увінчалися успіхом. Теоретичне інгібування, показане на Рис. 4, набагато менше експериментального; фактично, криві для систем в присутності і під час відсутності TFPI збігаються. p> TFPI - інгібітор типу Кюнітца, що містить три домену типу Кюнітца [35]. Відомо, що перший домен пов'язує фактор VIIa, а другий - фактор Xa. p> Функція третього домену поки невідома [35]. Вільний TFPI пов'язує VIIa повільно і слабо порівняно з фактором Xa [23]. Утворений комплекс Xa-TFPI здатний добре пов'язувати VIIa-TF, формуючи інгібіторний комплекс Xa-TFPI-VIIa-TF. Виходячи з цих даних, і був запропонований [23] двокроковий механізм дії TFPI: TFPI спочатку пов'язує Xa, потім комплекс Xa-TFPI пов'язує VIIa-TF, повністю пригнічуючи його активність. br/>В
Рис. 5. Вплив TFPI на утворення тромбіну в очищеній системі, яка містить фактори IX, X, VIII, V, II в концентраціях, вказаних в Таблиці 1. Активація проводиться 1.25 пМ комплексу VIIa-TF. Концентрація TFPI 2.5 нМ (?) Або 0 нМ (?). Експериментальні дані взяті з робіт [87, 88]. Теоретичні розрахунки (гладкі криві) зроблені за моделлю (9-34), з тим винятком, що константи, покладені нульовими (тобто працює тільки класичний механізм дії TFPI)
Нещодавно було показано [18], що загальноприйнятий двокроковий механізм дії TFPI не може пояснити експериментальні дані з кінетики інгібування комплексу VIIa-TF в процесі активації фактора X. Baugh et al. виміряли кінетичні константи взаємодії Xa з TFPI та комплексу Xa-TFPI з VIIa-TF. На підставі цих даних в тій же роботі [18] вони побудували математичну модель активації фактора Х комплексом VIIa-TF і інгібуючої дії TFPI. Оскільки в цьому процесі початково немає активованої форми фактора Х, модель передбачила досить слабке зменшення швидкості активації фактора X у присутності TFPI. В експерименті в цих же умовах автори роботи [18] отримали швидке і повне інгібування виробництва фактора Xа. Для пояснення виявленого протиріччя вони припустили, що основним шляхом інгібування є шлях, де TFPI інгібує сформувався раніше комплекс Xa-VIIa-TF. Вони запропонували схему, згідно з якою TFPI може зв'язуватися з фактором Xa в процесі його освіти вже на стадії фермент-продуктного комплексу Ха-VIIa-TF; потім слід внутримолекулярное перетворення на інгібіторний комплекс Xa-TFPI-VIIa-TF. Однак, запропонована схема детально досліджена була. p align="justify"> Щоб описати кінетику згортання повної системи, нами було проведено додаткове дослідження блоку реакцій, пов'язаних з активацією фактора X зовнішньої теназой і регуляцією цієї реакції інгібітором шляху тканинного фактора. Нижче наведено систему рівнянь для ...
