еті з товщиною шару 0,5 см.
Контрольну пробу готують перед фотометрією. Вона містить 0,5 мл дистильованої води, 0,5 мл розчину хлорної кислоти, 2 мл реактиву дише. Кип'ятять вміст пробірки протягом 10 хв на водяній бані. Охолоджують. p align="justify"> Розрахунок. Вміст ДНК у дослідній пробі х (г/л) розраховують за формулою
Еоп
х = ----
Їсть
де Еоп - екстинкція дослідної проби проти контрольної;
Їсть - екстинкція стандартної проби проти контрольної.
Оформлення роботи. За екстинкції розрахувати концентрацію дослідного зразка ДНК, вказати у висновку можливість використання дифениламиновой реакції для кількісного визначення ДНК. p align="justify"> б. Визначення вмісту РНК. Метод заснований на утворенні забарвленого комплексу рибози, що входить до складу РНК, з орціном. Інтенсивність фарбування пропорційна концентрації РНК в розчині. p align="justify"> Хід визначення. У дві пробірки додають по 2 мл відповідно досліджуваного (дослідного) і стандартного розчинів РНК, доливають по 2 мл орцінового реактиву і нагрівають на киплячій водяній бані 20 хв. Проби охолоджують. p align="justify"> фотометрах дослідної та стандартної проб проводять проти контрольної на ФЕК при червоному світлофільтрі (довжина хвилі 670 нм) у кюветі з товщиною шару 0,5 см.
Контрольна проба обробляється так само, тільки замість розчину РНК використовується така ж кількість дистильованої води.
Розрахунок. Концентрацію РНК в дослідному зразку х (г/л) розраховують за формулою
Еоп
х = ------
Їсть
де Еоп - екстинкція дослідної проби проти контрольної;
Їсть - екстинкція стандартної проби проти контрольної.
Оформлення роботи. За екстинкція розрахувати концентрацію дослідного зразка РНК, вказати у висновку можливість кількісного визначення РНК за орціновой реакції на пентози. br/>
ЛІПІДИ
Ліпіди - різнорідна за хімічною будовою група органічних речовин біологічного походження, практично нерозчинних у воді і легко розчинних в органічних неполярних (хлороформ, ефір, бензол, дихлоретан та ін) і полярних (етанол, метанол, ацетон та ін) рідинах. Різноманітність хімічної будови ліпідів ускладнює їх класифікацію. Цю групу речовин можна розділити на ліпідні мономери (жирні кислоти, вищі аліфатичні і аміноспирти та ін), прості ліпіди (ацілгліцеріни, воску, діольние ліпіди), складні ліпіди (фосфоліпіди і гліколіпіди) і стероїди (найбільш поширений з них - холестерин і його ефіри). Біологічні функції ліпідів у живих організмах різноманітні. Вони містяться в рідких середовищах і входять до складу біологічних мембран клітин організму. Зважаючи погану розчинність у воді ліпіди утворюють сполуки з гідрофільними молекулами - білками, вуглеводами. Освіта ліпід-білкових комплексів (ліпопротеїдів) надає липидам розчинність у воді і дозволяє транспортуватися з кров'ю і лімфою в організмі. Своєрідність розчинності використовується при дослідженні ліпідів, оскільки дозволяє відокремити їх від інших речовин, які знаходяться в біологічному матеріалі. Тому підбір розчинників в ході вилучення ліпідів із зразків має велике значення при їх аналізі. p align="justify"> Для виявлення і кількісного визначення окремих представників ліпідів, екстрагованих з біологічного матеріалу, існують різні физико-хімічні методи і реакції на функціональні групи. Аналіз ліпідів проводять шляхом постановки специфічних реакцій на складові частини в цілій молекулі або після її гідролізу. br/>
Робота 17. Дослідження фосфоліпідів
Фосфоліпіди містять вищі насичені і ненасичені жирні кислоти та їх альдегіди, які з'єднані ефірним зв'язком з гліцерином або сфінгозину, фосфорну кислоту і залишковий спирт (холін, етаноламін, серин, інозит). Залежно від будови розрізняють Фосфатидилхолін, фосфатіділінозіти, ацетальфосфатіди, кардіоліпін і сфінгофосфатіди. Особливо багаті фосфоліпідами нервова тканина, жовток яєць. p align="justify"> Реактиви. Етиловий спирт; 96%-ний; сульфат кальцію (гіпс, порошок); ацетон; хлорид калію, насичений розчин в 96%-ном етанолі; гідроксид натрію, 10%-ний розчин; соляна кислота, 10%-ний розчин; гідросульфіт калію , безводний порошок; реактив молібдату амонію *; нітрат калію, порошок; карбонат калію, порошок; азотна кислота, 10%-ний розчин; лакмусовий папір.
Обладнання. Ваги аптечні; ступка з товкачиком; скляні пластинки (100х50 мм); скляні палички; скальпель; очні піпетки; піпетки місткістю 2 і 5 мл; воронки з паперовими фільтрами; водяна баня; тиглі; сушильну шафу, відрегульований на 60? С.
Матеріал. Гол...
