му ацетонітрил - вода (з дещо меншим вмістом ацетонітрилу в порівнянні з системою метанол-вода, в якій отримано прийнятний час елюювання) - її селективність дещо інша. Нарешті, можна випробувати і систему тетрагидрофуран-вода (зі значно меншим вмістом тетрагидрофурана по порівнянні з системою метанол-вода), хоча вона значно менш зручна (гірше працює в ближній УФ-області, більш схильна до окислення). Нарешті, маючи селективність по всіх трьох системам звернення-фазних розчинників, можна визначити склад трьохкомпонентного (або навіть четирьохкомпонентного) розчинника, що забезпечує найкраще поділ усіх компонентів. Цим, проте, на практиці користуються рідко, задовольняючись зазвичай двокомпонентним розчинником найкращою селективності.
При роботі в нормально-фазному режимі з прищепленої фазою або в адсорбционном варіанті уравновесьте колонку з більш сильним розчинником, наприклад з системою гексан-ізопропанол у співвідношенні 100:10. Так само, як і в попередньому випадку, вводите пробу при цьому складі розчинника; далі повторюйте декілька разів, щоразу зменшуючи елююють силу розчинника (ряд співвідношень гексан - ізопропанол 100:3, 100:1, 100:0,3 і 100:0,1 і т.д.) до тих пір, поки не буде досягнуто поділ з k 'для останнього елююють компонента 8-10. Якщо отримана при цьому селективність вас не задовольняє, можна спробувати повторити цю роботу, замінивши модифікатор на інший (наприклад, ацетонітрил, метіленхлорід, оцтову кислоту і т.д.).
При цьому селективність природно, буде змінюватися. Можна також спробувати змінити привиту фазу на іншу, залишивши колишнім модифікатор, і за рахунок цього домогтися необхідної селективності.
При роботі в іонообмінному режимі підбір умови здійснюють аналогічно, починаючи з найбільш сильного буферного розчину і послідовно йдучи до слабшого. Селективність і елююють силу при цьому можна змінювати, змінюючи рН буферного розчину, вводячи великі чи менші кількості модифікатора - органічного розчинника (метанолу, ацуонітріла та ін) або замінюючи один буферний розчин на інший.
У разі використання іон-парної хроматографії вибір умов включає ті ж фактори, які використовують в іонообмінної хроматографії. Однак додатково селективність можна регулювати, домагаючись потрібного поділу, шляхом збільшення або зменшення концентрації іон-парного реагенту, а також змінюючи співвідношення полярної і неполярний груп у молекулі іон-парного реагенту.
Рухливі фази для ВЕРХ і ТШХ
Аналітична ВЕРХ вже давно відіграє ключову роль у контролі технологічних процесів, контролі якості фармацевтичної продукції та аналізі об'єктів навколишнього середовища.
Серйозні завдання змушують пред'являти високі вимоги до використовуваних в якості рухомої фази розчинників.
Низька УФ-поглинання, низьке вміст механічних домішок, низька кислотність або лужність в сукупності з малою кількістю сухого залишку після упарювання є необхідним умовою відтворюваності...
