інці дозволяють легко з'єднати два будь фрагмента ДНК в одне ціле. Отриманий фрагмент ДНК можна вбудувати в очищену ДНК плазміди або бактеріального вірусу. p align="justify"> Порівняння розмірів фрагментів ДНК після обробки відповідної ділянки геному набором рестріктаз дозволяє побудувати рестрикційну карту, яка відображатиме розташування певної послідовності нуклеотидів в даній ділянці. Порівнянням таких карт можна оцінити ступінь гомології між окремими генами без визначення їх нуклеотидноїпослідовності. Рестрікционниє карти важливі для клонування ДНК, рішення еволюційних і філогенетичних завдань. p align="justify"> Один з важливих етапів конструювання молекули ДНК - лігування (або зшивання) генів за допомогою фрагмента ДНК - лігази. Зшивання фрагментів ДНК, що містять потрібні гени, здійснюють двома основними методами:
а) за В«липкимВ» кінців;
б) за допомогою штучно добудованих В«липкихВ» кінців (ферментативним шляхом). В«ЛипкіВ» кінці - взаімнокомплементарние ділянки, довжиною з 4 ... 6 пар нуклеотидів. p align="justify"> Після того, як рекомбінантна ДНК зшита, її вводять в живі клітини.
3. У чому сутність методу іммобілізації ферментів шляхом включення в структуру гелю. Гелеобразующіе речовини органічної та неорганічної природи і приклади їх використання в біотехнології
Для іммобілізації ферментів в гелі існує два основних способи. При одному з них фермент поміщають у водний розчин мономера, а потім проводять полімеризацію, в результаті чого утворюється полімерний гель з включеними до нього молекулами ферменту. У реакційну суміш часто додають також біфункціональні (містять в молекулі два подвійні зв'язки) сшивающие агенти, які надають утворюється полімеру структуру тривимірної сітки. p align="justify"> В іншому випадку фермент вносять в розчин готового полімеру, який потім будь-яким чином переводять у гелевидний стан. p align="justify"> Спосіб іммобілізації ферментів шляхом включення до полімерний гель дозволяє створювати препарати будь-якої геометричної конфігурації, забезпечуючи при цьому рівномірний розподіл биокатализатора в обсязі носія. Метод універсальний, застосовний для іммобілізації практично будь-яких ферментів, Поліферментні систем, клітинних фрагментів і клітин. Фермент, включений в гель, стабільний, надійно захищений від інактивації внаслідок бактеріального зараження, так як великі клітини бактерій не можуть проникнути в дрібнопористу полімерну матрицю. У той же час, ця матриця може створювати значні перешкоди для дифузії субстрату до ферменту, знижуючи каталітичну ефективність іммобілізованого препарату, тому для високомолекулярних субстратів даний метод іммобілізації не застосовується взагалі. p align="justify"> Для першого варіанту використовують гелі поліакриламіду, полівінілового спирту, полівінілпіролідону, силікагелю, для другого - гелі крохмалю, агар-агару, каррагінана, агарози, фо...
