доливають 5-10 см3 дистильованої води і залишають до його повного розчинення.
Отриманий розчин пурпурного кольору кількісно переносять у мірну колбу місткістю 25 см3 і доводять об'єм розчину до мітки.
Оптичну щільність отриманого розчину визначають на колориметрі, використовуючи кювети товщиною поглинаючого шару 3 см при довжині хвилі 540 нм. Оптична щільність досліджуваного розчину не змінюється протягом 20 хв. Масову частку кофеїну (в перерахунку на суху речовину) обчислюють за формулою:
(2),
де: 1,03 - коефіцієнт, що враховує повноту вилучення кофеїну хлороформом на першому етапі екстракції;
с=60D - концентрація кофеїну в фотометрованих розчині, мкг/см3 (60 - коефіцієнт пропорційної залежності оптичної щільності розчину кофеїну від його концентрації в розчині);- Оптична щільність аналізованого розчину ТМПК); ф=25 - обсяг фотометрованих розчину ТМПК, отриманий в результаті гідролітичного окислення кофеїну, см; =100 - об'єм розчину каву для аналізу, см3;
- коефіцієнт переведення 1 мкг в 1 г; е. - об'єм розчину кави, який використовується для екстракції, см3;- Маса наважки кави, г;- Масова частка вологи аналізованої навішування кави,%.
За остаточний результат аналізу приймають середнє арифметичне результатів двох паралельних визначень, допустиме абсолютна розбіжність між якими не повинна перевищувати 0,1% при довірчій ймовірності P=0,95. Обчислення проводять до другого десяткового знака з наступним округленням до першого.
Розбіжність між результатами визначень, виконаних у двох різних лабораторіях, не повинно перевищувати 0,2% при довірчій ймовірності P=0,95.
Еталонний метод
Метод полягає в обробці кави розчином аміаку з метою добування кофеїну з проби кави, очищенню кофеїну чистим діетілефіром на двох колонках (перша - з лужною середовищем, друга - з кислим середовищем), добуванні кофеїну чистим хлороформом з розчину діетилового ефіру і визначенні його масової частки спектрофотометричним методом.
Підготовка аналізованого зразка
Розраховують масову частку сухої речовини в аналізованому зразку після визначення масової частки вологи - за ГОСТ 15113.4. Наважку натуральної розчинної кави масою (0,500 ± 0,001) г поміщають в хімічний стакан місткістю 100 см3, додають 5 см3 розчину аміаку і поміщають в киплячу водяну баню на 2 хв. Після охолодження розчин кількісно переносять у мірну колбу місткістю 100 см3 і дистильованою водою доводять об'єм до мітки, ретельно перемішують і охолоджують до кімнатної температури. За допомогою піпетки відбирають 2 см3 отриманого розчину, поміщають в хімічний стакан місткістю 100 см3, додають 3 г діатомової землі і ретельно перемішують.
Наважку декофеїнізованої розчинної кави масою (0,500 ± 0,001) г поміщають в хімічний стакан місткістю 100 см3, додають 5 см3 розчину аміаку і поміщають в киплячу водяну баню на 2 хв. Додають 6 г діатомової землі і ретельно перемішують.
Визначення масової частки кофеїну
Заповнення колонок
Колонка 1 (лужна) (рисунок Б.1)
Ретельно перемішують 3 г діатомової землі з 2 см3раствора їдкого натру до отримання однорідної суміші. (Матеріал для заповнення колонки може бути підготовлений заздалегідь і зберігатися в закритих ємностях. Для...
