препарату, поміщають в колбу місткістю 100 мл і доводять об'єм розчину спиртом етиловим 30% до мітки, нагріваючи (40 ° С) і перемішуючи до повного розчинення субстанції. 20 мл отриманого розчину наливають у пробірку для центрифугування, додають 20 мл реактиву осадження, перемішують скляною паличкою. Через 30 хвилин суміш центрифугують протягом 10 хвилин з частотою обертання 3000 об / хв. Надосадову рідину зливають, до осаду додають 20 мл 0.25% розчину аміаку. Перемішують тієї ж паличкою і знову центрифугують протягом 10 хвилин. Надосадову рідину зливають, осад у пробірці розчиняють у 5 мл 30% розчину кислоти оцтової і переносять кількісно в колбу на 250 мл за допомогою 70-100 мл води очищеної. Отриманий розчин нейтралізують 25 мл 5% розчину натрію гідрокарбонату, додають 0.5 мл ксіленового оранжевого і титрують 0.01м розчином трилону Б до зміни червонувато-фіолетового забарвлення розчину в жовту. 1 мл 0.01м розчину трилону Б відповідає 0.0013 г таніну. Вміст дубильних речовин у відсотках (Х) обчислюють за формулою:
де: - обсяг трилону Б, витрачений на титрування, в мілілітрах; - маса препарату, в грамах; - поправка до титру 0.01м розчину трилону Б (К=1) [10, 21, 48] .
3.3.2 Кількісне визначення флавоноїдів
Кількісне визначення флавоноїдів у сировині
Близько 2 г (точна наважка) подрібненої сировини поміщають в колбу з шліфом місткістю 150 мл, додають 30 мл спирту етилового 90%, що містить 1% кислоти хлороводневої концентрованої, колбу приєднують до зворотного холодильника, нагрівають на киплячій водяній бані протягом 1 години, охолоджують до кімнатної температури, фільтрують через паперовий фільтр у мірну колбу місткістю 100 мл. Екстракцію повторюють ще 2 рази зазначеним вище способом, фільтрують через той же фільтр в ту ж мірну колбу, фільтр промивають спиртом етиловим 90% і доводять об'єм фільтрату тим же спиртом до м?? Тки (розчин А).
У мірну колбу місткістю 25 мл поміщають 2 мл розчину А, додають 1 мл 1% розчину алюмінію хлориду в спирті етиловому 95% і доводять об'єм розчину тим же розчинником до мітки. Через 20 хвилин вимірюють оптичну щільність розчину на спектрофотометрі при довжині хвилі 430 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм. Як розчин порівняння використовують розчин, що складається з 2 мл розчину А, доведеного спиртом етиловим 95% до мітки в мірній колбі місткістю 25 мл.
Вміст суми флавоноїдів у перерахунку на кверцетин і абсолютно суху сировину у відсотках (Х) обчислюють за формулою:
, (10)
де: - оптична щільність досліджуваного розчину при довжині хвилі 430 нм;
.6 - питомий показник поглинання комплексу кверцетину з 1% алюмінію хлоридом при 430 нм;
W - втрата в масі при висушуванні сировини у відсотках;
m - маса наважки сировини в грамах [10, 21, 48].
Визначення вмісту флавоноїдів в субстанції:
мл препарату поміщають в мірну колбу місткістю 50 мл, доводять об'єм спиртом етиловим 70% до мітки, перемішують (розчин А).
мл отриманого розчину поміщають в круглодонную колбу місткістю 50 мл, додають 5 мл 5% розчину алюмінію хлориду, поміщають на 3 хвилини в киплячу водяну баню, швидко охолоджують, кількісно переносять за ...
