допомогою 10 мл спирту етилового 70% в мірну колбу місткістю 25 мл, додають 2 мл буферного розчину з рН 3.8, доводять об'єм розчину 70% спиртом до мітки і перемішують.
Вимірюють оптичну щільність отриманого розчину при довжині хвилі 409 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм, використовуючи як розчин порівняння розчин, що складається з 2 мл розчину А, 2 мл буферного розчину з рН 3.8, поміщений в мірну колбу місткістю 25 мл і доведений спиртом етиловим 70% до позначки.
Паралельно вимірюють оптичну щільність розчину, що містить 1 мл розчину СО ( рутина , або іншого) відібраного аналогічно випробуваному розчину, використовуючи як розчин порівняння розчин, що складається з 1 мл розчину СО і 2 мл буферного розчину з рН 3.8, поміщений в мірну колбу місткістю 25 мл і доведений спиртом етиловим 70% до позначки.
Зміст флавоноїдів (Х) в препараті, в перерахунку на СО у відсотках, обчислюють за формулою:
, (11)
де:
D 1 - оптична щільність досліджуваного розчину при довжині хвилі 409 нм;
D 0 - оптична щільність розчину СО при l max=409 нм;
m 0 - маса наважки СО, в грамах [10, 21, 48].
3.3.3 Визначення кількості фенолів
У мірну колбу місткістю 25 мл поміщають 5 мл випробуваного розчину препарату, 10 мл спирту етилового 30%, 1.5 мл 3% розчину заліза окисного хлориду, 10 мл 5% розчину натрію карбонату, доводять до мітки водою очищеною , збовтують. Залишають на 20 хв при кімнатній температурі, а потім центрифугують при швидкості 5000 об / хв протягом 10 хв у центрифужной пробірці місткістю 15 мл. Вимірюють поглинання надосадової рідини при довжині хвилі 720 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм в порівнянні з водою очищеною.
25 мл випробуваного розчину мають при зазначених умовах поглинання 0.276, в перерахунку на 0.05 мг стандартного розчину епікатехіну.
Загальний вміст фенолів у відсотках (X) розраховують за формулою:
, (12)
де: - оптична щільність надосадової рідини при довжині хвилі 720 нм [10, 21, 48].
3.3.4 Визначення кількісного вмісту амінокислот
Якісне виявлення амінокислот і визначення їх кількісного вмісту проводили методом ГХ: 1 г сухого залишку гідролізували в 5 мл 6 н соляної кислоти при 105 0 С в ампулах, запаяних під аргоном протягом 24 годин. Отриманий гідролізат концентрували насухо на вакуумному роторному випарнику при 40 0 ??С і отриманий осад розчиняли в 5 мл 5% сульфосалициловой кислоти. Розчин центрифугували, супернатант пропускали через іонообмінну колонку з Даукс 50 Н - 8, 200-400 м. Елюювання амінокислот вели 6 н розчином NH 4 OH, після концентрування якого до нього додавали свіжоприготованого SnCl 2, 1 краплю 2,2-діметоксіпропана, 1-2 мл пропанолу, насиченого HCl і нагрівали до 110 0 С. Цю температуру витримували протягом 20 хв, а потім реакційну суміш концентрували на роторному випарнику. До концентрату додавали 1 мл свіжоприготованого ацильного реактиву (1 обсяг оцтового ангідриду, 2 обсягу триетиламіну, 5 обсягів ацетону), нагрівали його при температурі 60 0 С протягом 1,5-2 хв і коцентріровалі насухо. До залишку додавали 2 мл етилацетату і 1 мл насичено...
