до температури 80 В° С, з періодичним додаванням до розчину певної кількості води. Власне стерилізацію здійснюють шляхом швидкого розігріву отриманого розчину глухим пором до 120-122 В° С в спеціальному апараті і витримують при цій температурі певний час, необхідне для повної загибелі всієї мікрофлори. Охолоджений розчин стисненим стерильним повітрям передають у попередньо підготовлений ферментатор. Температура стерилізації меляси вище, а тривалість значно менше, ніж ті ж параметри при стерилізації інших компонентів середовища.
Піногасник, використовуваний на стадіях культивування продуцента в посівному апараті і основному ферментере, особливо в тому випадку, коли їм є масло або жир, стерилізується окремо. Режими стерилізації (Температура і тривалість) при обробці пеногасителя жорсткіші, ніж це прийнято для стерилізації будь-яких поживних середовищ.
Процес отримання глутамінової кислоти вимагає строгих асептичних умов, і тому особлива увага приділяється стерилізації тільки середовища, а й усіх реакторів, комунікацій, що подається.
При стерилізації апаратури режими стерилізації залежать головним чином від матеріалу, з якого виготовлено обладнання і його окремі вузли. Найбільша ефективність стерилізації апаратури та комунікацій спостерігається при застосуванні гострої пари, що має температуру 135-140 В° С. Але окремі блоки апаратів, у тому числі датчики вимірювальних приладів, не витримують таких умов стерилізації, і тому в цих випадках можуть застосовуватися В«холодніВ» способи стерилізації. Для такої обробки можуть бути використані бактерицидні гази (етилен) і розчини хімічних реагентів (формаліну, суміші цітілпірідінового броміду і етанолмеркуріхлоріда у співвідношенні 2:1, різні похідні фенолу та їх суміші, амонійні солі первинних і вторинних алкілсульфатів, хлорвміщуючі з'єднання, | 3-пропіоллактон і т.д.).
Ступінь стерильності середовища, обладнання та комунікацій може бути перевірена. Простерилізованих середу або змиви, вироблені стерильною водою з внутрішніх поверхонь апаратів і трубопроводів, висівають на агаризованих або рідкі поживні середовища та інкубують в термостаті добу. Якщо середовища залишаються стерильними, то стерилізація проведена якісно. Такий аналіз проводиться при пуску заводу, у разі появи інфекції та періодично в профілактичних цілях. [2]
5.3 Приготування вихідної і посівної культури
Посівний матеріал на кожній зі стадії його отримання (від пробірок до посівного апарату) вирощують в строго асептичних умовах по 24 ч. Склад поживних середовищ незначно змінюється при переході від одного штаму до іншому і практично залишається постійним на кожній з проміжних стадій отримання посівного матеріалу. Тільки при вирощуванні продуцента в посівному апараті в живильне середовище вносять до 0,1% стерильного синтетичного пеногасітсля.
Накопичення біомаси до 6-8 м. АСВ на 1 л середовища роблять у аеробних умовах спочатку в інокуляторах об'ємом 2 м 3 , потім в посівних апаратах об'ємом 5 м. Отриманий посівний матеріал в кількості 5-6% (від об'єму середовища виробничих апаратів) стерильно передають в основні ферментатори на 50 м 3 . Коефіцієнт заповнення апарату 0,7. [2]
5.4 Вирощування продуцента в ферментаторі
Процес біосинтезу здійснюють в строго асептичних умовах у ферментаторах об'ємом 50 м 3 з коефіцієнтом заповнення апарату 0,7 протягом 48-52 год і інтенсивної аерації [80-85 мг Ог/(л-хв)], що відповідає витраті 1 об'єму повітря на 1 об'єм середовища в 1 хв. Температуру культивування на всіх стадіях підтримують постійною на рівні 28-30 В° С. В кінці процесу біосинтезу готова культуральна рідина містить до 45 р./л глутамінової кислоти. Вихід глутамінової кислоти по відношенню до Споживання цукру становить 45-50%.
Оскільки виробництво глутамінової кислоти направлено на отримання високоочищених препаратів, подальша технологічна схема передбачає виробництво продуктів, підготовлених безпосередньо до застосування в якості харчових добавок і у вигляді лікарських форм.
Виділення глутамінової кислоти з культуральної рідини і наступне очищення її відповідно до вимог фармакопеї
передбачає таку послідовність проведення технологічних операцій. [2]
5.5 Попередня обробка культуральної рідини
Здійснюється в результаті додавання до неї певної кількості негашеного вапна (або вапняного молока) з наступним осадженням надлишку іонів кальцію фосфорною кислотою. Утворений при цьому осад сприяє кращому відділенню клітин продуцента та інших баластних домішок. [2]
В
5.6 Відділення біомаси від культуральної рідини
Проводять центрифугуванням або фільтруванням під тиском. [2]
5.7 Посвітління фільтрату
Складається в очищенні його від пігментних домішок, офарблюючих нативний розчи...
