Це, мабуть, пов'язано з підвищенням десорбції актиноміцетів з поверхні грунтових частинок. p align="justify"> Очищення антибіотика проводиться хроматографічними методами (хроматографія на оксиді алюмінію, целюлозі, іонітах) або противоточной екстракцією. Очищені антибіотики піддають ліофільної сушці. p align="justify"> Після виділення антибіотика проводять випробування його чистоти. Для цього визначають його елементний склад, фізико-хімічні константи (температуру плавлення, молекулярну масу, адсорбцію у видимій, УФ-та ІЧ-областях спектру, питоме обертання). Досліджують також антибактеріальну активність, стерильність і токсичність антибіотика. p align="justify"> Токсичність антибіотиків визначають на експериментальних тварин, яким протягом певного періоду внутрішньовенно, внутрішньочеревно, внутрішньом'язово чи іншим шляхом вводять різні дози досліджуваного антибіотика. За відсутності зовнішніх змін у поведінці тварин протягом 12-15 сут вважають, що випробуваний антибіотик не володіє помітними токсичними властивостями. При більш глибокому дослідженні з'ясовують, чи володіє даний антибіотик прихованої токсичністю і чи впливає на окремі тканини і органи тварин. p align="justify"> Одночасно досліджують характер біологічної дії антибіотика - бактеріостатичний або бактерицидний, що дозволяє прогнозувати механізми його антибактеріальних властивостей.
Наступний етап вивчення антибіотика - оцінка його терапевтичних властивостей. Експериментальних тварин заражають певним видом патогенного мікроба. Мінімальна кількість антибіотика, що охороняє тварини від смертельної дози інфекції, є мінімальною терапевтичною дозою. Чим більше відношення токсичної дози антибіотика до терапевтичної, тим вище терапевтичний індекс. Якщо терапевтична доза дорівнює токсичної або наближається до неї (низький терапевтичний індекс), то ймовірність застосування антибіотика в лікувальній практиці обмежена або зовсім неможлива. p align="justify"> У тому випадку, коли антибіотик входить в широку медичну практику, розробляють промислові методи його отримання і детально вивчають його хімічну структуру.
Стандартизація антибіотиків. За одиницю антибіотичної активності приймають мінімальну кількість антибіотика, здатне придушити розвиток чи затримати зростання стандартного штаму тест-мікроба в певному обсязі живильного середовища. Величину біологічної активності антибіотиків висловлюють зазвичай в умовних одиницях дози (ЕД), що містяться в 1 мл розчину (ОД/мл) або в 1 мг препарату (ОД/мг). Наприклад, за одиницю антибіотичної активності пеніциліну прийнято вважати мінімальну кількість препарату, здатне затримувати ріст золотистого стафілококи стандартного штаму 209 в 50 мл поживного бульйону. Для стрептоміцину за одиницю активності прийнято вважати мінімальну кількість антибіотика, що затримує ріст Є. coli в 1 мл поживного бульйону. p align="justify"> Після того як багато антибіотики були отримані в чистому вигляді, для деяких з них стали висловлювати біологічну активність у масових одиницях. Наприклад, встановлено, що 1 мг чистого підстави стрептоміцину еквівалентний 1000 ОД. Отже, 1 ОД активності стрептоміцину еквівалентна 1 мкг чистого підстави цього антибіотика. Тому в даний час у більшості випадків кількість стрептоміцину висловлюють в мкг/мг або мкг/мл. Чим ближче число мкг/мг в препаратах стрептоміцину до 1000, тим, отже, чистіше препарат. p align="justify"> Зрозуміло, що одиниця біологічної активності антибіотика не завжди збігається з 1 мкг. Наприклад, для бензилпеніциліну 1 ОД еквівалентна приблизно 0,6 мкг, оскільки 1 мг антибіотика містить 1667 ОД. p align="justify"> Методи аналізу антибіотиків. На відміну від деяких інших природних сполук (алкалоїди, глікозиди) для антибіотиків не існує загальних групових реакцій. Такі реакції можуть бути використані тільки для антибіотиків одного хімічного класу, наприклад для тетрациклінів або ніт-рофенілалкіламінов (левоміцетин). p align="justify"> Для ідентифікації антибіотиків можуть бути використані різні кольорові реакції на відповідні функціональні групи; спектральні характеристики у видимій, УФ-та ІЧ-областях спектра; хроматографічні методи.
Для кількісного визначення антибіотиків використовують біологічні, хімічні, фізико-хімічні методи.
Біологічні методи засновані на безпосередньому біологічному дії антибіотика на застосовуваний тест-організм, чутливий до даного антибіотика. Вживаний при цьому дифузійний метод заснований на здатності молекул антибіотиків дифундувати в агарових середовищах. Оцінюється розмір зони, в якій використовуються тест-організми не розвиваються. Цей розмір залежить від хімічної природи антибіотика, його концентрації, рН та складу середовища, температури експерименту. p align="justify"> В основі іншого різновиду біологічного тестування лежить турбо-диметрий - метод кількісного аналізу за інтенсивністю світла, поглиненого зваженими частками...
