- клітинами мікроорганізмів. При додаванні певних кількостей антибіотиків спостерігається затримка росту клітин мікроорганізмів (бактеріостатичний ефект), а потім їх загибель (бактерицидний ефект). При цьому змінюється (зменшується) інтенсивність поглиненого світла. В якості альтернативного турбідиметрії методу може бути використаний Нефелометричний метод кількісного аналізу за інтенсивністю світла, розсіяного мікроорганізмами. p align="justify"> Для кількісного визначення антибіотиків застосовують різні спектральні методи - в першу чергу, фотоколориметричний і спект-рофотометріческіе методи. Наприклад, для визначення концентрації розчину еритроміцину можна застосувати фотоколориметричний метод, заснований на зміні абсорбції розчину антибіотика після взаємодії його з сірчаною кислотою. Антибіотики тетрациклінового ряду можуть бути визначені спектрофотометричним методом по смузі поглинання, зникаючої після лужного гідролізу діючої речовини. p align="justify"> Розроблено спосіб, що поєднує фізико-хімічний і біологічний підходи до оцінки активності ЛЗ. Метод заснований на лазерній дифракції в середовищі, що містить клітини мікроорганізмів при дії на них хімічних речовин, зокрема антибіотиків
Збереження штамів продуцентів антибіотиків в активному стані
Важливе значення для промислового отримання антибіотиків, а також для лабораторних досліджень продуцентів антибіотичних речовин мають методи підтримки життєздатності організмів, що дозволяють зберегти їх антибіотичну активність на постійному рівні.
Відомо, що мікроорганізми і особливо актиноміцети легко змінюються при звичайних методах їх зберігання. Причому досить часто при цьому спостерігається повна або часткова втрата антибиотических властивостей. p align="justify"> Втрата антибиотических властивостей залежить, мабуть, від того, що ми не вміємо в звичайних умовах культивування створити такі умови, які б сприяли збереженню організмом його основних фізіологічних особливостей. Нерідко втрата активності спостерігається при культивуванні мікроорганізмів на багатих за складом середовищах і при частих пересіву. p align="justify"> Разом з тим зміна фізіологічних або біохімічних властивостей продуцентів антибіотичних речовин може визначатися, їх генетичними закономірностями. Відомо, наприклад, що продуцент граміцидину С в процесі розвитку дисоціює на ряд варіантів, деякі з яких не утворюють цей антибіотик. Причому процес дисоціації культури йде в напрямку освіти у великій кількості біологічно неактивних варіантів, що в кінцевому підсумку призводить до повної втрати культурою здатності освіти граміцидину. p align="justify"> В даний час використовується ряд методів збереження культур продуцентів антибіотиків, що забезпечує їх тривале перебування в активному стані. В основу цих методів покладено принцип затримки розвитку мікроорганізмів, принцип консервації. Для кожного виду продуцента антибіотичнихречовин повинен бути підібраний свій, найбільш відповідний метод консервування, що дозволяє зберегти культури в активному стані протягом відносно тривалого часу. p align="justify"> Найбільш поширеними методами збереження культур мікроорганізмів-продуцентів антибіотиків в активному стані є наступні.
Ліофілізація культур.
Зберігання вегетативних клітин або суперечка організмів у стерильній грунті, стерильному піску або на насінні деяких рослин (наприклад, просі). За даними ряду авторів, культури актиноміцетів, що знаходяться у стерильній грунті, зберігають життєздатність протягом 30 років і більше.
Зберігання спір у вигляді водних суспензій в запаяних ампулах.
4. Зберігання спір у стерильному кварцовому піску. p align="justify">. Зберігання культур на агаровом косячки під мінеральним маслом. p align="justify"> 6. Зберігання культур при низьких температурах (+4, +5 В° С). p align="justify">. Останнім часом для збереження різних мікроорганізмів в активному стані використовують рідкий азот, в який завадять відмиту від середовища суспензію клітин. Іноді в газоподібній фазі рідкого азоту зберігають культури актиноміцетів, що знаходяться на агарових блочками, вирізаних з агарової пластинки в чашках Петрі. p align="justify"> Найкращою формою збереження організмів, при якій не спостерігається втрати антибіотичної активності, є їх ліофілізація - метод придатний як для спорообразующнх, так в для бесспорових культур мікроорганізмів. Сутність цього методу полягає в тому, що суспензія клітин або суперечка мікроорганізму, приготована на середовищі, багатої білками (часто використовується для цих цілей кров'яна сироватка), швидко заморожується при температурі від - 40 до - 60 В° С і висушується під вакуумом до залишкової вологості ( 0,5-0,7%). Після такої обробки ампули зі спорами або клітинами ліофнлізірованного м...
