гуляція експресії гена BNP може здійснюватися також під дією нейрогормонов. Зв'язування таких нейрогормонов як ендотелін-I, ангіотензин-II і агоністів адренергічних рецепторів з відповідними рецепторами призводить до значного збільшення експресії гена BNP [20].
Синтез і процесинг proBNP
людини синтезується у вигляді препрогормонов, що складається з 134 АК. Молекула preproBNP людини містить гидрофобную сигнальну послідовність, що складається з 26 амінокислотних залишків, яка відщеплюється котрансляціонно в шорсткогоЕПР до закінчення синтезу С-кінцевій частині молекули прогормона. Молекули proBNP (108 амінокислотних залишків) піддаються подальшому процесингу з утворенням фізіологічно неактивною N-кінцевій частині (NT-proBNP) і біологічно активної молекули BNP (Мал. 3). Було показано, що в плазмі людини присутні три форми пептиду: BNP, proBNP і NT-proBNP [6]. Припускають, що розщеплення proBNP відбувається в кардіоміоцитах або безпосередньо в момент секреції, або перед секрецією в кровотік. Однак до кінця це питання не вивчений.
Рис.3
Експресія гена proBNP характерна як для міоцитів передсердь, так і для міоцитів шлуночків серця людини [21]. Однак міоцити передсердь і шлуночків значно відрізняються один від одного за принципом зберігання і секреції пептидів. У міоцитах передсердь присутні секреторні гранули, що містять як інтактні молекули proBNP, так і продукти розщеплення молекули попередника. Міоцити шлуночків серця, навпаки, не містять таких гранул і продуктів розщеплення proBNP. З іншого боку, є деякі дані про те, що при захворюваннях серцево-судинної системи в шлуночках також утворюються секреторні гранули, і в тканини присутні продукти розщеплення proBNP. Крім того, показано, що фібробласти серця також синтезують BNP [22]. Клітини коронарної судинної мережі також експресують ген BNP, принаймні, при коронарному атеросклерозі [23].
В роботі [24] було показано, що основна частина імунореактивного BNP, що циркулює в крові хворих з тяжкою стадією СН являє собою proBNP. Як на ендотеліальних, так і на клітинах гладких м'язів судин було показано, що молекула proBNP володіє в 6-8 разів меншою фізіологічною активністю в порівнянні з BNP. Однак механізм, що призводить до збільшення вмісту непроцессірованной форми proBNP в кровотоці хворих з важкими формами СН до цих пір залишається неясним. Процесинг proBNP в серці до цих пір залишається слабо вивченим. Однією з основних причин цього є відсутність хороших клітинних моделей in vitro. Неонатальні міоцити можуть бути вирощені в культурі протягом короткого періоду часу, однак при цьому не відбувається їх диференціювання в зрілі клітини передсердь і шлуночків [21].
Припускають, що proBNP розщеплюється ендопротеазой фурином, оскільки при СН показано одночасне збільшення експресії генів фурину і BNP. Крім того, proBNP містить мотив Arg-XX-Arg в положенні 73-76 АК, за яким відбувається розщеплення молекул попередника фурином. Також було показано, що при інгібуванні фурину in vitro процесинг proBNP блокується [21].
Фурин є найбільш вивченою протеазой, що здійснює процесинг молекул попередників. Ген фурину людини був встановлений в 1989 році [25]. Цей ген був вперше охарактеризований як ген, асоційований з протоонкогенів c-fes/feps. Подальше клонування повної кДНК і експресія до...
