що субодиниці були сформовані від злиття двох плазмід, і що вони частіше піддаються до більш високій частоті злиття у вторинній кон'югації. Припускали, що є посередник при злитті. Крім того, оборотна область була відповідальна за експресію (вираз) генів, керуючих скупченням клітин.
У 1987, Ползін і Симідзу-Kадота виділили і охарактеризували вставки послідовностей, що беруть участь в кон'югативного формуванні ML3. Плазміда лактотобактеріі в ML3 містила дві копії вставок послідовності, 1SS1S, які були подібні послідовностям 1S26 грамнегативних бактерій. У L. lactis 712, хромосомальние визначили розташування статевого чинника, які замість плазмід були відповідальні за високочастотний коньюгаціонний перенесення у лактобактерій.
У 1980 Гейссон розробляв методи для формування та відновлення протопластів, а також використання протопластів для того, щоб успішно перекомбініровать і передавати гени шляхом злиття протопластів. Після цього в 1982 Гeйс, Koндo і Маккей успішно використовували протопласти для поліетилен-індукованої трансфекції і відповідно трансдукції. У 1986 році була проведена електропорація всіх клітин, а також в 1887 році Сандерсом і Никлсон описано поліетилен гліколь-інддуцірованная трансформація всіх клітин. Трансформація та розвиток ефективних методів електропорації були переглянуті пізніше.
Розробка ефективних систем передачі генів, особливо коньюгации і трансформації, поширення плазмід серед лактобактерій забезпечило генетичне свідоцтво про редагуванні різних фенотипічних властивостей до дискретних плазмід. Передача бажаних генів господарям, що відчувають нестачу в них, також проявляє до себе комерційним інтерес.
Трансформація також зіграла ключову роль у розвитку методології клонування генів і молекулярних досліджень експресії генів. Застосовувалися дві стратегії клонування: клонування безпосередньо в лактобактерії та за допомогою векторів шатла для клонування гетерогенних господарів таких як, Sanguis Streptococcus , Bacillus subtilis і Escherichia сoli .
Молекулярні дослідження проводили за допомогою генетичних інструментів, які тепер стали доступними. Де Вос, ван дер Воссен та ін. Встановили, що організація послідовності рибосомнуих ділянок, промотор, а також термінаційного послідовності деяких генів лактобактерій подібні до інших грампозитивних бактерій. Крім того, Кок та ін. Встановили, що сигнал послідовності протеїназ L. cremoris Wg2 були подібні протеазам серину сімейства subtilisin .
і 1980 рр. були пов'язані з розвитком і назріванням етапів генетики лактобактерій. Застосування генетичних інструментальних засобів роз'яснило багато цікавих аспектів про ці організмах.
5. Розмноження
Бактерії молочнокислі розмножуються шляхом ділення клітин, іноді перешнуровиванієм. Описано процес розмноження деяких бактерій молочнокислих за допомогою гонідій, при якому на кінцях паличок утворюються зернятка (гонідіі), що збільшуються в розмірах, витягуються і перетворюються на палички, а також утворення у бактерій молочнокислих фільтруються форм. Японськими дослідниками доведено наявність у бактерій молочнокислих процесу спороутворення.
. Ріст і розвиток
На ріст і розвиток бактерій молочнокислих впливають різні фактори.
Вуглецеве харчування . Найбільш важливими джерелами енергії для бактерій молочнокислих є моно і дисахариди (глюкоза, лактоза, сахароза, мальтоза), а також органічних кислоти (лимонна, яблучна, піровиноградна, фумарова, оцтова і мурашина) в концентрації 30 - 50 мкг/мл. З жирних кислот ріст бактерій молочнокислих стимулюють олеїнова, лінолева, а також ліноленова. При відсутності зброджуваний углеродсодержащих субстратів бактерій молочнокислих можуть використовувати амінокислоти як джерело енергії. Деякі штами зброджують полісахариди.
Азотне харчування . Значне число бактерій молочнокислих не здатна синтезувати органічних форми азоту і тому потребують для свого росту в присутності їх в середовищі; тільки деякі з бактерій молочнокислих використовують мінеральні сполуки азоту для синтезу ряду органічних сполук. Для задовільного росту бактерій молочнокислих необхідний ряд амінокислот: аргінін, цистеїн, глутамінова кислота, лейцин, фенілаланін, триптофан, тирозин, валін.
Вітаміни . Всі види паличковидних бактерій потребують пантотенової кислоті, біотвані, нікотинової кислоті, а гетероферментативні - ще й в тіаміні. Потреби в пуринових підставах і тіаміні пов'язані з потребами в аминобензойной або фолієвої кислотах. ...
