фідобактерій оптимальною є температура 36-38 ° С, рН 6-7.
При гідролізі пектинової кислоти пектіназ протягом перших стадій розкладання акумулюються тільки невеликі кількості вільної D-галактуроновой кислоти. Зазвичай ферментами розкладаються ді-, три -, тетра - і пентагалактуроновие кислоти. У наступні стадії гідролізу довгі молекули розпадаються під впливом каталітичної діяльності пектиназу і накопичується вільна D-галактуроновая кислота та інші сполуки.
Розпад пектинової кислоти може бути виражений наступною схемою:
С46Н68О40 + nН20=СНТ (СНОН) 4СООН + С6Н12О6 + С5Н10О5 + С5Н10 ПРО5 + СН3ОН + СН3СООН
Продукти розпаду пектинової кислоти (галактоза, арабиноза та ін.) піддаються окисленню або сбраживанию різноманітними мікроорганізмами. Зокрема, при Анаеробіоз вони зброджуються бактеріями. Продуктами бродіння є органічні кислоти (оцтова, молочна), а також гази Н2 і СО2, крім зазначених речовин, утворює і невелика кількість ацетону і бутилового спирту.
ЧАСТИНА II. ЕКСПРІМЕНТАЛЬНАЯ
. 1Тітріметріческое визначення вмісту карбоксильних груп в пектине
Методика визначення вмісту вільних карбоксильних груп (ОСТ 18-62-72):
Близько 1 г промитого і висушеного пектину поміщають в колбу на 300 мл, змочують чистим 96% -ним етиловим спиртом для запобігання грудкування і додають 100 мл дистильованої води, перемішують і залишають на ніч для повного розчинення пектину. Розчин титрують 0,1 н NaOH до появи червоного забарвлення, не зникає протягом 1 хвилини, при додаванні 6 крапель індикатора Хинтона (для його приготування змішують 1 обсяг 0,4% бромтимолблау, 1 обсяг 0,4% -ного червоного крезолу, 3 обсягу 0,4% червоного фенолу і 1 обсяг дистильованої води).
Вміст вільних карбоксильних груп Кс,%, розраховують за формулою (1).
(1)
Для проведення експерименту нами був обраний як бактерій препарат «Біфідумбактерин форте». Цей препарат є мікробну масу живих бактерій антоганістіческі активного штаму Bifidobacterium bifidum №1, сорбованих на частинках активованого вугілля, ліофілізовану, змішану з лактозою.
Система пектин-бактерії:
В якості субстрату нами був використаний буряковий пектин, який розчиняли на водному термостаті при температурі 40 ° С що відомо з літератури.
Для приготування системи брали розчин пектину, концентрацією 1 грам на 100 мілілітрів, і акуратно всипали бактерії (в одному пакетику не менше 50 млн колонієутворюючих одиниць) в колбу. Один пакетик препарату на 100 мл розчину.
Перший експеримент проводився протягом 28 годин, результати дослідження представлені в таблиці 2.1.1.
Таблиця 2.1.1
Час, мінV (NaOH) б, млV (колби), млV (аліквоти), млm (пектину), ГКС б,% V (NaOH) без б, млКс без б,%? Кс, %01,415500105,116,23041,4156,230401201,525500105,116,71481,56,60471,672401,6500105,117,04501,56,60476,674801,6500105,117,04501,56,60476,676001,615500105,117,11111,56,60477,6714401,62500105,117,13311,56,6047816801,655500105,117,28721,56,604710,33
Другий експеримент проводився протягом 29 годин 30 хвилин, результати дослідження представлені в таблиці 2.1.2.
Таблиця 2.1.2
Час, мінV (NaOH) б, млV (колби), млV (аліквоти), млm (пектину), ГКС б,% V (NaOH) без б, млКс без б,%? Кс, %01,43500105,136,27191,436,271901201,515500105,136,64471,56,578911801,61500105,137,06141,5056,60096,983901,61500105,137,06141,5056,60096,986001,615500105,137,08331,5056,60097,3114401,62500105,137,10531,5056,60097,6415901,625500105,137,12721,5056,60097,9717701,635500105,137,17111,526,66677,57
На графіку 2.1.1 представлені результати 2-х дослідів:
Графік 2.1.1
Система глюкоза-бактерії:
В якості субстрату нами була використана глюкоза.
Для приготування системи брали розчин глюкози, концентрацією 1 грам на 100 мілілітрів, і акуратно всипали бактерії (в одному пакетику не менше 50 млн колонієутворюючих одиниць) в колбу. Один пакетик препарату на 100 мл розчину.
Досвід проводився протягом 28 годин, результати дослідження представлені в таблиці 2.1.3:
Таблиця 2.1.3
Час, мінV (NaOH) б, млV (колби), млV (аліквоти), млM (глюкози), ГКС б,% V (NaOH) без б, млКс без б,%? Кс, %00500205,002200001200,23500205,00220,5178000,51722400,26500205,00220,5847000,58474800,28500205,00220,6297000,62976000,29500205,00220,6522000,652214400,35500205,00220,7871537000,787216800,4...