ої щільності стандартного і досліджуваного розчинів виробляли в одній і тій же кюветі, то l х=l ст; молярний коефіцієнт світлопоглинання? є постійним для даного пофарбованого речовини. Отже, наведене вище рівність можна спростити:
А х/А ст=С х/С ст
звідки
З х=А х * З ст/А ст
Розрахувавши невідому концентрацію С х (мг/мл), з урахуванням розбавлення розчинів знаходять вміст у розчині визначається речовини qx (мг)
x=С х * V х * V заг/V 1
Тут V х - обсяг пофарбованого досліджуваного розчину, мл; 1 - об'єм аліквотної частини досліджуваного розчину, взятої для приготування забарвленого розчину, мл; заг - загальний обсяг досліджуваного розчину, мл.
Метод порівняння застосовується при одноразових аналізах і вимагає обов'язкового дотримання основного закону світлопоглинання.
Існує й інший спосіб визначення невідомої концентрації С х. наготовлюють два стандартних розчину з концентраціями З 1 і С 2 так, щоб оптична щільність першого з них А 1, була б менше оптичної щільності А х досліджуваного розчину, а оптична щільність А 2 друга стандартного розчину була б, навпаки, більше, ніж А х.
Невідому концентрацію досліджуваного розчину розраховують за формулою:
З х=С 1 + (С 2 - С 1) * (А х - А 1)/(А 2 - А 1)
Якщо значення концентрацій (або значення оптичної щільності) досліджуваного і стандартних розчинів досить близькі, то цей спосіб більш точний.
2.2 Метод визначення за середнім значенням молярного коефіцієнта світлопоглинання
Метод визначення концентрації речовини за середнім значенням молярного коефіцієнта світлопоглинання є різновидом методу порівняння, тільки в даному випадку потрібно безпосередньо розраховувати значення молярного коефіцієнта світлопоглинання і за його значенням знаходити невідому концентрацію досліджуваного забарвленого розчину. Готують досліджуваний і стандартні забарвлені розчини і вимірюють значення їх оптичної щільності аналогічно тому, як це роблять при визначенні по методу порівняння. За даними, отриманими для стандартних розчинів, розраховують середнє значення молярного коефіцієнта світлопоглинання:
? ср=А ст/(С ст * l ст)
Знаючи значення оптичної щільності досліджуваного забарвленого розчину і молярного коефіцієнта світлопоглинання, знаходять невідому концентрацію С х (моль/л) досліджуваного забарвленого розчину і загальний вміст в розчині визначається речовини qx (мг):
З х=А х/(? ср * l х) і qx=С х * V х * V заг * М/V 1
Тут М - молекулярна маса визначається речовині (іона).
Вимірювання оптичної щільності стандартного і досліджуваного розчинів можна робити як при однаковій товщині шару (в однакових кюветах), так і при різній його товщині (у різних кюветах). Метод вимагає обов'язкового дотримання основного закону світлопоглинання і застосовується порівняно рідко.
. 3 Метод градуювального графіка
Для визначення вмісту речовини методом градуювального графіка при вибраних оптимальних умовах готують серію з 5-8 стандартних розчинів різних концентрацій (не менше 3 паралельних розчинів для кожної точки)
При виборі інтервалу концентрацій стандартних розчинів керуються такими положеннями:
1. Він має охоплювати область можливих змін концентрацій досліджуваного розчину; бажано, щоб оптична щільність досліджуваного розчину відповідала приблизно середині градуировочной кривої;
2. Бажано, щоб в цьому інтервалі концентрацій при вибраних товщині кювети (l) та аналітичної довжині хвилі? (в більшості випадків? =? макс светопоглощающего з'єднання) дотримувався основний закон світлопоглинання, т. е. графік А=f (С) був прямолінійним; При Фотоколориметричні визначеннях вибір світлофільтру (значення? =? Макс) у загальному випадку визначається не тільки видом кривих спектрів поглинання забарвленого розчину і світлофільтру, а й спектральною чутливістю фотоелемента.
. Інтервал робочих значень А, відповідний інтервалу стандартних розчинів, повинен забезпечувати максимальну відтворюваність результатів вимірів (мінімальне відношення SA/A), т е. А ~ 0.14 - 1.9, однак слід мати на увазі, що на практиці при значеннях А gt; 1.1 - 1.3 зазвичай спостерігається вже нелінійний характер залежності А=f (С). Необхідно також враховувати, що загальна похибка фотометричного аналізу визначається сукупністю доданків, з яких у ряді випадків визначальну роль можуть грати похибка невоспроиз...
