ції розподіляються між орг. і водної фазами, що дозволяє залежно від коеф. розподілу в-в між фазами зрушувати рівновагу р-ції в потрібну сторону; диспергування фаз збільшує пов-сть їх розділу і тим самим покращує доступ субстрату до ферменту. Серед способів іммобілізації наиб. поширення набули ковалентное зв'язування ферменту з матрицею і включення ферменту в гель. У першому випадку в якості матриці зазвичай використовують целюлозу, декстранових гелі (сефароеу, агарозу), мікропористі скла або кремнеземи, а також синтетичні. полімери. Матрицю при ковалентного іммобілізації ферментів зазвичай попередньо активують, обробляючи, напр., Бромцианом, азотистої к-тій чи ціанурхлорид. Завдяки цьому вона стає носієм активних угруповань, к-які здатні вступати в р-цію поєднання, взаємодій. з групами NH2, ВІН, СООН. У другому випадку в якості гелеутворюючого полімеру використовують поліакриламід. На практиці іммобілізація часто здійснюється одночасно неск. способами. Так, при фіксації ферментів ковалентними зв'язками між їх молекулами і матрицею зазвичай виникають також Нековалентні взаємодії. Відомі способи передуватиме. хім. модифікації молекул ферменту нізкомол. в-вами або р-рімимі полімерами, мають заряджені угруповання, що змінює у таких модифікується. білків електростатіч. заряд молекули і дозволяє досить міцно сорбировать їх на іонообмінних смолах. При всіх типах іммобілізації матриця, взаємодіючи з ферментом, може інактивувати останній або створювати просторів. утруднення для доступу субстрату до активного центру. При ковалентном зв'язуванні ферменту для запобігання отріцат. впливу матриці між нею і молекулою ферменту вводять роз'єднувальний ланцюг атомів - спейсер (наз. також В«вставкоюВ» або В«ніжкоюВ»). Крім того, часто прагнуть використовувати для іммобілізації гідрофільні матриці, що створюють поблизу ферменту більш природ. микроокружение. При іммобілізації ферментів необхідно, щоб активні групи матриці не блокували каталитич. центр ферменту, а умови іммобілізації не приводили до втрати його активності. Певні обмеження на спосіб іммобілізації накладають та особливості субстрату. Так, у разі високомол. субстратів не можна використовувати методи инкапсулирования або включення ферменту в гель. Якщо матриця несе на собі заряди, то заряд субстрату впливає на кинетич. параметри р-ції: різнойменні заряди на носії і субстраті збільшують швидкість р-ції, катализируемой іммобілізованими ферментами, однойменні заряди її знижують і м. б. причиною повної втрати активності препарату. Заряди носія і субстрату впливають також на величину рН, при до-рій швидкість ферментативної р-ції максимальна. Важливу роль грає розподіл субстрату між фазами іммобілізованого ферменту і р-ра. Обмежена доступність субстрату до активного центру ферменту може призвести до зміни специфічності останнього. Особливо це Характерно для високомол. субстратів, к-які через малу коеф. дифузії повільно переходять у фазу іммобілізованого фе...
