ді обмежуючим фактором є
концентрація протівоіона в рухомій фазі; підвищуючи його концентрацію, можна збільшити максимальну концентрацію вводиться речовини. При підвищенні концентрації протівоіона та відповідному зміні значень k 'зразка можливе одночасне додавання надлишку нейтральної солі у водну фазу, що стабілізує значення k '. Отримуємо закономірність, аналогічну закономірності впливу буферного розчину. Максимальна кількість введеного зразка може бути підвищений при додаванні зразка у вигляді іонних пар. При цьому до введення в хроматограф протиіон змішують із зразком, а рН доводять до потрібного значення.
Вплив температури має в іон-парної хроматографії велике значення. При використанні механічно утримуваних нерухомих фаз колонка повинна бути термостатувати. У іон-парної хроматографії застосовують звичайно фази з підвищеною в'язкістю, а підвищення температури знижує її. Залежність селективності від температури також найбільш виражена в іон-парної хроматографії.
Застосовуючи протівоіони, поглинаючі в УФ-області, можна отримувати за іон-парному поділі легко виявляються спектрофотометром іонні комплекси. Потрібно, однак, щоб протівоіони нерозчинялися в органічній фазі щоб уникнути високого поглинання виходить з колонки розчину. Таким чином, використовуючи іон пікрату або 2-нафтілсульфоната, можна виявити аміни.
Одним з утруднень, найбільш часто зустрічаються в іон-парної хроматографії, є нестабільність колонок, особливо в обернено-фазному режимі. У колонках з звичайної фазою спостерігається поступовий винесення протівоіона з нерухомої фази, однак цього можна уникнути, отримуючи іонні пари до введення зразка в хроматограф. Великим недоліком іон-парної хроматографії є ​​утворення хвостів. Причиною цього є або дисоціація іонних пар, яка зменшується при підвищенні концентрації протівоіона, або неправильна концентрація буферного розчину. Іноді вдається зменшити затягування зон і збільшити ефективність розділення, перейшовши від звичайної іон-парної хроматографії до хроматографії з використанням поверхнево-активних речовин.
Такий спосіб поділу, мабуть, придатний для аналізу дуже полярних молекул, наприклад сульфованих барвників. Довжина вуглецевого ланцюга нерухомої фази також варіюється в іон-парної хроматографії.
Відтворюваність колонок у іон-парної хроматографії задовільна на відміну від такої в іонообмінної хроматографії.
Іон-парну хроматографію зазвичай застосовують для аналізу фізіологічних і біологічних рідин, полярних сполук і речовин з кількома іонізіруемимі групами, в тому числі проміжних продуктів барвників. Розфасовані реагенти для іон-парної хроматографії, що складаються з буфера і протівоіона, які можна безпосередньо додавати в рухому фазу, випускає фірма В«УотерсВ». До них відноситься реактив А (0,005 М розчин тетрабутіламмонійфосфата, рН = 7,5), реактив В-5 (0,005 М розчин пентансульфокіслоти, рН = 3,5) і реактив В-7 (0,005 М розчин гептансу...
