для одних і тих же досліджуваних речовин спостерігається однаковий результат в даному тесті і тестах на тварин, тобто якщо показана кореляція).
Даний метод не вимагає знання каріотипу та ідентифікації типів пошкоджень хромосом, є простим, економічним і досить чутливим для визначення «мутаген» чи «не мутаген» фактор.
Метод дозволяє реєструвати хромосомні мутації типу делецій і транслокаций, наслідком яких є наявність мостів і фрагментів в ана- і телофазе. Метод дозволяє виявити зміна поведінки хромосом на веретені поділу. Allium-test ідеально підходить для проведення мікроядерного тесту.
Відомий і поширений тест Еймса по чутливості та достовірності результатів значно поступається Allium-test при оцінці забруднень. Крім того Allium-test був рекомендований для тестування зразків різних наноматеріалів, тоді як тест Еймса виявився неприйнятні, у зв'язку з помилково негативні результатами.
Дослідження мутагенних властивостей наночастинок діоксиду титану на кореневих меристемах Allium cepa і лімфоцитах людини показало, що обидва тести виявляють подібну чутливість до даного веществу.cepa L. як тест об'єкта широко застосовується для оцінки генетичного потенціалу хімічних сполук, природних і стічних вод.
Лук має 16 добре профарбовують хромосом (2n=16). Тривалість клітинного циклу становить приблизно 17,8 години. Мітотичний індекс може коливатися в різних коренях одного і того ж рослини, але усереднені дані є досить стійкими. Тривалість мітозу в різних тканинах кореня Allium cepa однакова і не змінюється по довжині кореня. Співвідношення різних фаз мітозу не залежить від часу фіксації.
Найбільш часто застосовується аналіз частоти хромосомних аберацій в ана-телофазе мітозу (ана-телофазний тест). У цьому тесті реєструються хромосомні мутації типу делецій і транслокаций, а також порушення веретена поділу за частотою відставання хромосом, багатополюсних і асиметричних мітозів. Ана-телофазний метод з використанням лука в якості тест-об'єкта рекомендований як тест-об'єкта природних середовищ. При порівнянні мутагенної активності хімічних забруднювачів, визначених в інших токсікогенетіческіх тестах з ана-телофазним методом встановлено, що чутливість його висока і становить 82%.
Однак облік тільки хромосомних аберацій може призвести до заниження реального генотоксичної ефекту, наприклад, з наступних причин. По-перше, ці методи не дозволяють реєструвати генні мутації, які виникають значно частіше хромосомних. По друге, хромосомні мутації виявляються, як правило на тлі високої мітотичної активності меристематичних клітин. Підвищена токсичність факторів середовища може викликати зниження кількості клітин, які діляться за рахунок затримки клітинного циклу в точках контролю, або загибелі частини клітин, отже при цьому штучно знизиться і частота реєстрованих хромосомних пошкоджень.
В даний час термін Allium-test використовується поряд з постійно зростаючою кількістю об'єктів і при цьому продовжує залишатися одним з найкращих тест-об'єктів для аналізу генотоксичности різних факторів.
Рослинні тест-системи отримують все популярнішими при оцінці мутагенного забруднення довкілля. Це обумовлено цілим рядом переваг рослин як індикаторів генотоксичности різних факторів, так і сигнальних об'єктів при генетичному моніторингу за станом навколишнього середовища [1, 14].
1.3 Мітотичний поділ клітин
Мітоз (від грец. Mitos - нитка), званий також кариокинезом, або непрямим поділом клітин, є універсальним механізмом ділення клітин. Мітоз слід за G2-періодом і завершує клітинний цикл.
Він триває 1-3 години і забезпечує рівномірний розподіл генетичного матеріалу в дочірні клітини. Мітоз включає 4 основні фази: профазу, метафазі, анафазу і телофазу.
Мітоз - це один з фундаментальних процесів онтогенезу. Мітотичний поділ забезпечує зростання багатоклітинних еукаріот за рахунок збільшення популяцій клітин тканин.
У результаті мітотичного поділу клітин меристем збільшується кількість клітин тканин рослин. Дроблення заплідненого яйця і ріст більшості тканин у тварин також відбувається шляхом мітотичних поділів.
На підставі морфологічних особливостей мітоз умовно поділяється на стадії: профазу, прометафазі, метафазу, анафазу, телофазу. Перші описи фаз мітозу і встановлення їх послідовності були зроблені в 70-80-х роках XIX століття. Наприкінці 1870-х років німецький гістолог Вальтер Флеммінг для позначення процесу непрямого поділу клітини ввів термін «мітоз».
Тривалість мітозу в середньому становить 1-2 години. Мітоз клітин тварин, як правило, триває 30-60 хвилин, а рослин - 2-3 години. За 70 років в ті...
