концентрацію сечовини в сироватці крові. p align="justify"> Оформлення роботи. Зробити розрахунок вмісту сечовини та азоту сечовини в досліджуваній сироватці та сечі. У висновку зазначити можливі зміни в азотному обміні. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі вміст сечовини в сироватці крові людини становить 3,0-7,0 ммоль/л, а азоту сечовини - 1,2-3,7 ммоль/л. Вміст сечовини в сироватці крові значно коливається залежно від прийому білків з їжею. Підвищення рівня сечовини в крові (азотемія) відзначається при захворюваннях нирок (коли порушена їх видільна функція), при посиленому розпаді білків, надмірному білковому харчуванні, а також у разі зневоднення організму (в даному випадку має місце відносна, а не абсолютна форма азотемії). Зниження рівня сечовини в крові і виділення її зі сечею (на добу в нормі виділяється 333-582,8 ммоль/добу) спостерігається при захворюванні печінки (паренхіматозна жовтуха, дистрофія печінки, цироз), що пов'язано з порушенням мочевінообразовательная функции. br/>
Робота 62. Кількісне визначення креатину та креатиніну за методом Брауна
Реактиви. Пікринова кислота, насичений розчин *; соляна кислота, 0,1 моль/л; основний калібрувальний розчин креатиніну *; 12,5% розчин їдкого натрію. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; піпетки на 0,2, 1,0, 2,0 і 5,0 мл; ФЕК; водяна баня. p align="justify"> Матеріал. Досліджувана сеча. p align="justify"> Принцип методу. Заснований на здатності креатиніну в лужному середовищі з пікринової кислотою утворювати комплекс оранжевого кольору, інтенсивність якого пропорційна концентрації креатиніну. Визначення креатину проводиться після переведення його на креатинін при нагріванні сечі в солянокислой середовищі. p align="justify"> Хід визначення. У три мічені звичайні пробірки внести по 0,2 мл концентрованої соляної кислоти (обережно, тільки піпеткою з гумовою грушею!). У 1-у і 2-у пробірки додати по 0,2 мл досліджуваної сечі, попередньо розведеної в 5 разів: 1 пробірка служить для визначення креатиніну, 2 - креатину, 3 - контрольна. Другу пробірку нагріти протягом 5 хвилин на бурхливо киплячій водяній бані, після чого охолодити під краном. У всі пробірки внести дистильовану воду в таких кількостях: перша пробірка - 2,0 мл, друга - 2,0 мл, третя - 2,2 мл і в кожну додати по 0,6 мл насиченого розчину пікринової кислоти і по 1,0 мл 12,5% розчину гідроксиду натрію, ретельно перемішують. Залишають стояти на 10 хвилин при кімнатній температурі, після чого в усі три пробірки додають за 6,0 мл дистильованої води. Оптичну щільність досліджуваних розчинів визначали на ФЕК з довжиною хвилі 507 нм в кюветі на 10 м проти контрольної проби (третя пробірка). Кількість визначалося за калібрувальним графіком. p align="justify"> Розрахунок. Знаходять вміст вільного креатиніну в першій пробірці за калібрувальним графіком, а потім, використовуючи нижченаведену формулу, проводять розрахунок:
a? 5? 1000? 5
х = -------,
1000? 1000
де х - кількість креатиніну в г на 1 л сечі;
а - кількість креатиніну в мкг в 0,2 мл розведеної сечі, взятої для аналізу;
- розведення сечі;
- для переведення кількості креатиніну з 0,2 мл сечі на 1 мл,
- перерахунок на 1 л, чисельник;
- для перекладу мкг в мг, знаменник;
- для перекладу мг креатиніну в м, знаменник.
Розрахунок креатину - друга пробірка містить суму вільного креатиніну та креатиніну, переведеного з креатину при нагріванні в солянокислой середовищі. З кількості креатиніну, отриманого при визначенні суми креатин-креатинін, віднімають кількість паралельно досліджуваного вільного креатиніну та отриману різницю множать на 1,16 - коефіцієнт переведення креатиніну в креатин. p align="justify"> Побудова калібрувального графіка: з робочого калібрувального розчину креатиніну готують розведення, як зазначено нижче:
№ № пробиРабочій калібр. р-р креатиніну, млРаствор пікринової кислоти, мл2, 5 моль/л розчину NaOH, млДістіллірованная вода, млКонцентр. креатиніну в пробі, ммоль/л10, 43,00,2 До обсягу 1 0 мл4020, 83,00,28031,63,00,216042,43,00,224053,23,00,2320
Оформлення роботи. Розрахувати вміст креатину і креатиніну в досліджуваній пробі і у висновках дати оцінку отриманим результатам, порівнюючи з нормою. p align="justify"> Практичне значення роботи. Креатинін, поряд з сечовиною і солями амонію є нормальними продуктами азотистого обміну і на його частку припадає близько 2,5-7% всього азоту сечі. Креатиніну в нормі виділяється з сечею: 4,4-17,7 ммоль/добу або 0,5-2,0 г/добу. У нормі сеча дорослих людей креатину не містить. У дітей має місце фізіологічна креатинурія, тому в сечі він виявляється у невелики...
