между лінзою про єктіва и оком. Через перший фільтр світло проходити только в одному напрямку, другий фільтр має головну вісь, яка розташовується перпендикулярно Першому фільтру, и ВІН НЕ пропускає світло. Виходим ефект темного поля. Обидвоє фільтра могут обертатіся, змінюючі напрямок пучка світла. Если аналізатор повернути на 90 ° по відношенню до поляризатора, то світло проходити через них не буде. Структури, що містять поздовжньому орієнтовані молекули (колаген, мікротрубочкі, мікрофіламенті), и Кристалічні структури (в клітінах Лейдіга1) при зміні осі Обертаном проявляються як світяться. Здатність крісталів або паракрісталліческіх Утворення до роздвоєння світлової Хвилі на звічайна и перпендикулярно до неї назівається Подвійне променезаломлення. Такий здатністю мают фібрілі поперечносмугастіх м'язів.
3.3 Електронна мікроскопія
Великим кроком вперед у розвитку техніки мікроскопії були Створення і! застосування електронного мікроскопа (дів. Рис. 1, Б). У Електрон мікроскопі вікорістовується потік електронів з більш короткими, чем в світловому мікроскопі, довжина ХВИЛЮ. При напрузі 50000 В довжина Хвилі електромагнітніх коливання, что вінікають при Русі потоку електронів у вакуумі, дорівнює 0,0056 нм. Теоретично розраховано, что разрешаемое відстань в ціх условиях может буті около +0002 нм, або 0,000002 мкм, тобто в 100 000 разів менше, чем в світловому мікроскопі. Практично в СУЧАСНИХ Електрон мікроскопах разрешаемое відстань складає около 0,1-0,7 нм.Такім чином, методи заморожування - сколювання і заморожування - травлення дозволяють вивчати нефіксовані клітини без освіти в них артефактів, що викликаються фіксацією. Методи контрастування солями Важка металів дозволяють досліджуваті в Електрон мікроскопі ОКРЕМІ макромолекул - ДНК, великих білків (например, міозін). При негативному контрастуванні вівчають агрегати макромолекул (рибосоми, віруси) або білкові філаменті (Актінові нитки).
Електронна мікроскопія ультратонких зрізів, отриманий методом кріоультрамікротоміі. При цьом методі шматочкі тканин без фіксації и заливки в тверді середовища Швидко охолоджують в рідкому азоті при температурі - 196 ° С. Це Забезпечує гальмування метаболічних процесів клітін и Перехід води з рідкої фази в тверду. Далі блоки ріжуть на ультрамікротоме при нізькій температурі. Такий метод Приготування зрізів зазвічай Використовують для визначення актівності ферментів, а такоже для проведення імунохімічніх реакцій. Для Виявлення антігенів застосовують антитіла, пов'язані з частко колоїдного золота, локалізацію которого легко віявіті на препаратах.
Методи сверхвісоковольтной мікроскопії. Використовують електронні мікроскопі з пріскорює напругою до 3000 тисяч В. Перевага ціх мікроскопів в тому, что смороду дозволяють досліджуваті про єкти Великої товщини - 10 мкм), тому что при вісокій ЕНЕРГІЇ електронів смороду менше поглінаються про єктом. Стереоскопічна зйомка дозволяє отрімуваті інформацію про трівімірної организации внутрішньоклітінніх структур з скроню роздільною здатністю (около 0,5 нм).
рентгеноструктурній аналіз. Для Вивчення Структури макромолекул на атомарному Рівні застосовують методи з використанн рентгенівськіх променів, что мают Довжину Хвилі около 0,1 нм (діаметр атома водних). Молекули, что утворять крісталічну решітку, вівчають помощью діфракційніх картин, Які реєструють на фотопластінці у виде безлічі плям різної інтенсівності. Інтенсівність плям покладів від здатності різніх про єктів в решітці розсіюваті випромінювання. Положення плям в діфракційної картіні покладів від положення про єкта в сістемі, а їх інтенсівність свідчіть про его внутрішню атомної структурі.
. 4 Методи дослідження фіксованіх клітін и тканин
Основним про єктом дослідження є гістологічні препарати, пріготовлені з фіксованіх структур. Препарат может являти собою мазок (например, мазок крови, кісткового мозк, сліні, цереброспінальної Рідини та ін.), Відбіток (например, селезінкі, тимуса, печінкі), плівку з тканини (например, сполучної або очеревіні, плеврит, м якої мозкової Оболонков), тонкий зріз. Найбільш часто для Вивчення вікорістовується зріз тканини або органу. Гістологічні препарати могут вівчатіся без спеціальної ОБРОБКИ. Например, приготовання мазок крови, відбіток, плівка або зріз органу могут відразу розглядатіся під мікроскопом. Альо внаслідок того, что Структури мают Слабкий контраст, смороду погано віявляються в звічайна світловому мікроскопі и потрібне использование спеціальніх мікроскопів (фазово-контрастні та ін.). Тому Частіше застосовують спеціально оброблені препарати.
Процес виготовлення гістологічного препарату для світлової та Електронної мікроскопії Включає следующие основні етапи:
) взяття матеріалу и его фіксація;
