ляє розділяти багатокомпонентні суміші на індивідуальні речовини високою ступеня чистоти. ВЕРХ відрізняється високою чутливістю {до 10 6 г). На поділ 10-15 компонентів витрачається 20-30 хв. p> Рідинний хроматограф включає такі вузли, як дозатор, насос високого тиску, високоефективна колонка, детектор з реєструючим пристроєм. Колонки виготовляють з нержавіючої сталі, вони мають довжину 10-25 см, внутрішній діаметр 0,3-0,8 см і щільно набиваються адсорбентом з розміром частинок 5-10 мкм. В якості елюенту використовують різні вуглеводні в поєднанні з етанолом. Детектором зазвичай служить спектрофотометр з змінною довжиною хвилі (190-900 нм), але існують також флуоріметріческой. електрохімічні та інші детектори.
Справжність випробовуваних ЛВ підтверджують за часом виходу кожного компонента суміші з колонки, яке буде стабільно при однакових умовах проведення експерименту. Кількісний вміст розраховується за площею піку, яка пропорційна кількості ЛВ в пробі. (2)
4. Методи виділення кумаринів
Для виділення кумаринів з рослин зазвичай застосовуються різні розчинники: етанол, метанол, бензол, хлороформ, діетиловий і петролейний ефіри або їх комбінації.
4.1. Найбільш повна екстракція кумаринів (у вільній формі і у формі глікозидів) досягається при використанні спирту етилового різних концентрацій, як на холоду, так і при нагріванні. Для очищення суми кумаринів від супутніх речовин густий екстракт, отриманий після відгону екстрагента, обробляють хлороформом, діетиловим або петролейним ефіром. При використанні в якості екстрагента петролейного ефіру добре витягується суміш фурокумаринів, які після концентрування екстракту можна виділити в кристалічному стані. У ряді випадків додатково проводиться обробка екстракту активованим вугіллям, киплячою водою з наступним згущенням та подальшим витяганням гідроксильованих і метоксильованих кумаринів хлороформом, етилацетат і бутанолом, безпосередня обробка сухого залишку сумішшю хлороформу - етиловий спирт (97:3) (для виділення аналогічних похідних) або ж використовується саме спиртове витяг. Наприклад, для вилучення суми 7-гідроксильованих кумаринів з коріння Helianthus annum L. запропоновано проводити послідовну екстракцію ацетоном, сумішшю ацетон - метанол (1:1) з наступним звільненням від пігментів у ділильної воронці сумішшю гексан - ефір (6:4). Іноді доцільно рослинний матеріал обробляти петролейним ефіром, а потім вичерпно екстрагувати хлороформом або метанолом. Для виділення пеуцеданін застосовують екстракцію метанолом в апараті Сокслета, аналогічним способом з використанням послідовної екстракції насіння Angelica archangelica L. н-гексаном, дихлорметаном і метанолом і подальшої препаративної ТШХ були виділені шість похідних фурокумаринів. Ці ж екстрагенти дозволяють отримати суму кумаринів і фурокумаринів з рослини Metrodorea flavida. Для виділення гідрокси-, алкоксікумарінов та їх глікозидів з насіння Aesculus hippocastanum L. застосовується ек...
