за формулою з використанням калібрувального графіка:
З В· 10
АЛК = -----,
А В· 2
де С - кількість АЛК в пробі (мкмоль), знайдене за калібрувальним графіком;
А - вміст креатиніну в пробі (г);
- коефіцієнт розведення сечі;
- обсяг фільтрату (мл).
Коефіцієнт перерахунку мікрограм АЛК в мікромолі - 0,0076.
Оформлення роботи. За отриманими екстинкція зробити розрахунок змісту дельта-аминолевулиновой кислоти і висновок про причини можливих змін. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі вміст АЛК в сечі 3,9-19 мкмоль/г креатиніну (0,52-2,5 мг/г креатиніну). Виділення аминолевулиновой кислоти з сечею збільшується при патологічних процесах, пов'язаних з порушенням порфіринового обміну, а також при інтоксикації свинцем, бензолом та іншими токсичними речовинами. br/>
Робота 76. Кількісне визначення вмісту копропорфіріна в сечі за методом Соулсбі в модифікації Рімінгтон
Реактиви. Оцтова кислота льодяна; ефір медичний; соляна кислота 1,4 моль/л; йод, спиртовий розчин 0,039 моль/л; розчин йоду в соляній кислоті (200 обсягів соляної кислоти і 1 обсяг спиртового розчину йоду). p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; піпетки місткістю 0,2; 2,0 і 5,0; ділильні воронки, спектрофотометр. p align="justify"> Матеріал. Свежевиделенних сеча (термін зберігання не більше 3-х годин). p align="justify"> Метод заснований на здатності йоду переводити копропорфіріноген в копропорфірін, який визначається спектрофотометрично за різницею оптичної щільності при трьох довжинах хвиль.
Хід визначення. У ділильну воронку вносять 2 мл сечі, 0,2 мл крижаної оцтової кислоти, 5 мл ефіру та струшують протягом 1 хвилини. Після поділу фаз нижній водний шар відкидають. До ефірному шару, який містить копропорфірін і копропорфіріноген, додають 5 мл розчину йоду в соляній кислоті для перекладу копропорфіріногена в копропорфірін, струшують протягом 1 хвилини. Після поділу фаз нижній шар переносять в пробірку, термостатують при 37 Вє С, протягом 5 хвилин. Потім вміст пробірки струшують і вимірюють оптичну щільність розчину в кюветах з товщиною шару 1 см при трьох довжинах хвиль: 380, 402 і 430 нм проти 1,41 моль/л розчину соляної кислоти. p align="justify"> Розрахунок проводять за формулою:
[2 В· E402 - (E430 + E380)]? 2,093 В· 1,52 нмоль/г креатиніну
КП = --------------------------
А
де Е402, Е430, Е380 - оптична щільність розчину при відповідних довжинах хвиль;
А - вміст креатиніну в пробі (р);
, 52 - коефіцієнт перерахунку мікрограм КП в наномолях;
, 093 - коефіцієнт для розрахунку вмісту КП, запропонований Рімінгтон.
Оформлення роботи. За отриманими результатами зробити розрахунок змісту копропорфіріна і зробити висновок про причину можливих змін. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі вміст копропорфіріна в сечі 30,5-122 нмоль/г креатиніну (20-80 мкг/г креатиніну). Підвищення змісту копропорфірія в сечі спостерігається при спадковій копропорфірія, гострої переміжної порфірії, ерітропоетіческой уропорфірії, а також при цирозі, гепатиті, свинцевої інтоксикації. br/>
РЕГУЛЯТОРИ ОБМІНУ РЕЧОВИН
До регуляторам метаболізму можна віднести вітаміни, гормони, гормоноподібні речовини та медіатори. Свою функцію вони здійснюють за допомогою модифікації активності ферментів або впливу на їх кількість у клітинах. Тому при дослідженні даної групи біологічних сполук застосовують як методи якісного та кількісного аналізу цих речовин і продуктів їх обміну, так і оцінку стану системи регуляторів організму за їх дії на відповідні ланки метаболізму. br/>
1. Дослідження вітамінів
Робота 77. Якісні реакції на вітаміни
Реактиви. Хлороформ; сірчана кислота, конц.; Сульфанілова кислота, 1%-ний розчин; нітрит натрію, 5%-ний розчин, свіжоприготований; карбонат натрію, 10%-ний розчин; азотна кислота, конц.; Діетилдитіокарбамат натрію, 2%-ний спиртовий розчин; гідроксид натрію, 4%-ний спиртовий розчин; гідросульфіт натрію, порошок; хлорид заліза (III), кристалічний; тіосечовина, кристалічна.
Обладнання. Штатив із пробірками; скальпель; ваги аптечні з важками; беззольні фільтри; флуороскопа. p align="justify"> Матеріал.
Риб'ячий жир.
Токоферол, 0,1%-ний спиртовий розчин.
Вітамін К, насичений розчин в 70%-ном етанолі.
