(Psti) HclF-11-206 або Z-pBR 322 (Pstl)/HclN SN 35-AHL6 (SU 1764515), штам Е. coli pINF-AP2 (SU 1312961), штам Е. coli pINF-F-Pa (AU 1312962), штам E.Coli SG 20050 з плазмидой p280 /21FN (Кравченко В.В. та ін Біоорганічна хімія, 1987, т.13, № 9, с.1186-1193), штам E.Coli SG 20050 з плазмидой pINF14 (SU 1703691), штам E.coli SG 20050 з плазмидой pINF16 (RU 2054041) та ін Недоліком технологій, заснованих на використанні цих штамів, є їх нестабільність, а також недостатній рівень експресії інтерферону. p align="justify"> Поряд з особливостями використовуваних штамів ефективність процесу багато в чому залежить від використовуваної технології виділення та очищення інтерферону.
Відомий спосіб отримання інтерферону, що включає в себе культивування клітин Ps. putida, руйнування біомаси, обробку поліетиленіміну, фракціонування сірчанокислим амонієм, гідрофобну хроматографію на фенілсілохроме С-80, рН-фракціонування лізата, його концентрування і діафільтрацію, іонообмінну хроматографію на целюлозі DE-52, елюювання в градієнті рН, іонообмінну хроматографію отриманого елюенту на целюлозі СМ -52, концентрування пропусканням через касету фільтрів і гель-фільтрацію на сефадексе G-100 (SU 1640996). Недоліком цього способу крім складної багатостадійної ферментації є многостадийность при отриманні кінцевого продукту. p align="justify"> Відомий також спосіб отримання інтерферону, що включає в себе культивування штаму E.coli SG 20050/pIF16, в LB-бульйоні в колбах в термостатовому шейкері, центрифугування біомаси, її промивку буферним розчином і обробку ультразвуком для руйнування клітин . Отриманий лизат центрифугують, промивають 3М розчином сечовини в буфері, розчиняють в розчині гуанідин хлориду в буфері, обробляють ультразвуком, центрифугують, проводять окислювальний сульфітоліз, діаліз проти 8 М сечовини, ренатурація і остаточну двостадійну хроматографію на СМ-52 целюлозі і сефадексе G-50 ( RU 2054041). p align="justify"> Недоліками цього способу є його відносно невисока продуктивність основних етапів процесу виділення та очищення. Особливо це відноситься до ультразвукової обробці продукту, діалізу і окислювальному сульфітолізу, що призводить до нестабільності виходу інтерферону, а також до неможливості використання цього методу для промислового виробництва інтерферону. p align="justify"> В якості найбільш близького аналога (прототипу) може бути вказаний спосіб отримання лейкоцитарного інтерферону людини, що полягає в культивуванні рекомбінантного штаму E.coli, заморожуванні отриманої біомаси при температурі не вище -70 В° С, розморожуванні, руйнуванні клітин мікроорганізму лізоцимом, видаленні ДНК і РНК введенням в лизат ДНК-ази та очищенням виділеної нерозчинної форми інтерферону відмиванням буферним розчином з детергентами, розчиненні осаду інтерферону в розчині гуанідин гідрохлориду, ренатурації і одностадійної очищенню іонообмінної хроматографією. В якості продуцента використовують штам E.coli SS5, отриманий за допомого...
