піі.
Корекцію функції мутантних генів і відновлення їх експресії можна здійснити двома шляхами: 1) заміною мутантного гена його нормальної копією, 2) введенням нормальної копії гена при схоронності мутантної. Найбільш часто застосовують другий підхід генотерапевтіческой корекції спадкових дефектів, що обумовлено технічними труднощами, що виникають як при видаленні мутантного алеля, так і при подальшому вбудовуванні його нормальної копії. p align="justify"> Перші успішні досліди по гемотерапіі спадкових захворювань проведені в 1990 р. в США Вони були спрямовані на корекцію генетичного дефекту при важкому комбінованому імунодефіциті, обумовленому мутацією в гені аденозіндезамінази. Зниження активності цього ферменту призводить до вираженого придушення імунної відповіді в результаті накопичення в організмі дезоксіаденозіна, який надає токсичну дію на Т-і В-лімфоцити. Введення двом хворим з цим важким захворюванням нормальної копії гена з Т-лімфоцитами або стовбуровими клітинами кісткового мозку призвело до практично полнойкомпенсаціі імунодефіциту. На сьогоднішній день проведено вже більше 600 клінічних випробувань за генотерапіі ряду моногенних і онкологічних захворювань людини. Однак до теперішнього часу генотерапевтіческая корекція спадкових дефектів не знайшла широкого застосування в клінічній практиці. Це пов'язано насамперед з проблемою доставки генетичного матеріалу і не можливістю існуючими методами домогтися стабільної експресії трансдуцірованного гена в клітинах і тканинах хворого. Розробляються два основних способи доставки генів у соматичні клітини людини - invitro і invivo. Перший спосіб припускає перенесення генів в культуру клітин людини, після чого транcдуцірованние клітини вводяться в організм господаря. При другому способі доставка нормального гена здійснюється безпосередньо в організм людини. Використовуються два основних способи доставки генетичного матеріалу в клітини людини: прямий переноснекомпактизированной (В«голоїВ») плазмідної ДНК, вільної від білків, з якими вона зазвичай пов'язана в хромосомах, і доставка генних конструкцій за допомогою векторних систем.
Для прямого перенесення генетичного матеріалу в клітину використовують флуоресцентно-мічену плазмідну ДНК, методику гідродинамічного шоку, насичення ДНКполіаніоном (гепарином, декстран-сульфатом), а також ряд фізичних способів доставки ДНК. Серед фізичних методів доставки генетичних конструкцій в організм людини: електропорація, баллістіческаятрансфекція (В«генное рушницюВ») і безігальное введення (бомбардування клітин молекулами ДНК, пов'язаними з різними металами - Аі +, Са + +). p align="justify"> В якості векторних систем можуть бути використані деякі віруси, ліпосоми (ліпідні бульбашки з включеними в них фрагментами ДНК) і катіонні полімери (Полиетиленаміни, полілізін, лізин-гистидино...
