продуктів.
.3 Ізотопні індикатори в біології, медицині та сільському господарстві
У біології ізотопні індикатори <# «justify"> 2. Авторадіографія
Основне призначення авторадіографії - реєстрація смуг радіоактивно мічених препаратів (білків і НК) після електрофорезу. Для цієї мети використовують медичну «неекрановану» рентгенівську плівку (у плівках із захисним шаром на поверхні поглинається частина випромінювання). Почорніння рентгенівської плівки (після прояву) відбувається як під дією електронів, так і у-випромінювання. Препарати, мічені тритієм, зважаючи на малу проникаючої здатності його (3-електронів, лише у випадку дуже високих інтенсивностей випромінювання вдається реєструвати даним методом. Авторадіографія препаратів, мічених S і С здійснюється цілком успішно. Однак пластинки ПААГ в цих випадках необхідно перед реєстрацією радіоактивності повністю висушувати . Інакше Р-електрони, що випускаються в глибині гелю, не досягнуть плівки. Сушать гель, уклавши його на товсту фільтрувальний папір (він прилипає і при сушінні не зіщулюється), 1-2 години у вакуумі і з нагріванням або 36 годин на повітрі при кімнатній температурі - до стану тонкої, міцної і прозорої плівки. Проте, небажано, щоб товщина вологого гелю перевищувала 0,4 мм. Рентгенівську плівку накладають емульсією прямо на гель. У такій постановці досвіду Р-електрони вуглецю і сірки проникають в шар емульсії на глибину близько 0,25 мм. Для хорошого прилягання плівки до гелю під кришку відповідної касети з пружинними затискачами кладуть прокладку з губчастої гуми. Саму касету загортають у чорний папір. Експозиція триває кілька днів. Потім слід, як звичайно, прояв і фіксація.
Енергія Р-випромінювання радіоактивного фосфору досить велика, щоб його авторадіографію можна було вести прямо з вологою пластини гелю. Гель, покритий плівкою, залишають на одній зі скляних пластин, загортають у тонкий поліетилен і експонують, як було описано вище, протягом кількох годин - краще на холоді (- 20 °), з тим, щоб перешкодити розпливання смуг в гелі під час експозиції за рахунок дифузії. Р-електрони радіоактивного фосфору можуть проходити в матеріалі рентгенівської плівки до глибини в 6 мм. Це означає, що велика частина їх «прошиває» плівку, що не передавши всю свою енергію молекулам бромистого срібла і, отже, не найкращим чином реєструються. Іноді, якщо інтенсивність Р-випромінювання невелика (за дещицею змісту), ці «пропадає марно» електрони вловлюють за допомогою фосфоресцирующего екрану, який встановлюють по інший бік плівки. Потрапили на екран Р-електрони викликають його світіння і плівка реєструє (не без деякого розмиття зображення) ще й світиться смугу на екрані. Зате яскравість почорніння в цьому випадку може збільшитися в 5-8 разів.
Оскільки при використанні флюоресценції екрану можлива релаксація кристалів бромистого срібла, що розпалися під дією світла, експозицію плівки краще проводити в цьому випадку при - 70 °. Для правильного суміщення плівки після прояву з вихідним гелем, на ньому до авторадіографії роблять дві позначки по кутах радіоактивними чорнилом.
.1 Переваги та недоліки авторадіографії
Авторадіографія вельми популярний метод детекції різних нуклеотидів. Але як і у будь-якого методу у неї теж існують свої переваги і недоліки.
...
