в титрах з нормальною і гіперімунною сироватками становить 2 lg і більше. p> Реакція імунофлюоресценції. Є методом експрес-діагностики, так як дозволяє встановити діагноз протягом 2-3 годин з моменту доставки патологічного матеріалу. p> З бурси Фабриціуса полеглих або убитих з діагностичною метою птахів на тонких, сухих, знежирених предметних стеклах готують мазки-відбитки (не менше 3), фіксують 10-20 хвилин у ацетоні, двічі відмивають у двох змінах 0,01 М фосфатно- сольового буфера (рН = 7,2-7,4), потім висушують і фарбують за загальноприйнятою методикою. Контрольні мазки-відбитки готують з бурси здорових курчат. p> Реакцію вважають позитивною, якщо на всіх препаратах виявлено не менше 3-х лімфоцитів зі специфічним яскраво-зеленим світінням антигену в цитоплазмі (дрібні гранули або дифузний ореол навколо ядра).
Крім мазків-відбитків для РИФ можна досліджувати кріосрези бурси Фабриціуса. Для цього орган заморожують у петролейном ефірі, охолодженому до мінус 76 В° С в суміші ацетону і сухого льоду. Потім їх приморожують до блоку мікротому. Зрізи готують завтовшки 4-5 мкм. p> Реакція гальмування непрямої гемаглютинації. Дана методика може застосовуватися для індикації вірусного антигену в патологічному матеріалі, а також ідентифікації вірусу, виділеного в КЕ та КК. p> З патологічного матеріалу від хворих і полеглих птахів, хоріон-аллантоісной оболонок полеглих після зараження КЕ готують гомогенат на стерильному 0,85%-ном розчині натрію хлориду (рН = 7,2-7,4) в співвідношенні 1:1. Після триразового заморожування і відтавання гомогенат центрифугують при 5000 об./Хв. протягом 25 хвилин. Надосадову рідину зливають для дослідження в РТНГА. Проби аллантоісной рідин використовуються в нативному вигляді після центрифугування 15-20 хвилин при 3000 об./Хв. Таким же способом готують суспензії від контрольних птахів і КЕ. Крім того, використовують специфічну імунну сироватку до вірусу хвороби Гамборо і позитивний еритроцитарний антиген з набору діагностикумів БелНІІЕВ для серологічної діагностики даної хвороби в РНГА. p> РТНГА ставлять мікрометодом з використанням мікротитратор Такач. При цьому, в перший ряд лунок панелі готують в обсязі 0,025 мл дворазове розведення випробуваного матеріалу від 1:2 до 1:128. Для цього в кожну лунку вносять 0,025 мл 0,85%-ного розчину натрію хлориду, що містить 0,5% гліцерину. У першу лунку вносять 0,025 мл випробуваного матеріалу і, перемішуючи, 0,025 мл переносять в іншу лунку і т.д. (До розведення 1:128. У другому ряду таким же чином готують безвірусного суспензію. До кожного розведення обох рядів додають 0,025 мл імунної сироватки, розведеної на 1-2-кратних розведень менше, ніж її граничний титр в РНГА. Панель із сумішами струшують і поміщають у термостат на 60 хв. при 37 В° С. Облік реакції здійснюють після осідання еритроцитів.
Реакція вважається позитивною, якщо в першому ряду з випробуваним матеріалом відбудеться гальмування аглютинації в перших двох-трьох лунках з...
