ється через 48-72 години після зараження культури клітин і характеризується вакуолізацією і округленням клітин, явищами каріопікноз і каріолізис. Специфічність цитопатичних змін підтверджують постановкою РН.
Біопроба на курчатах. Для зараження використовують 21-денних SPF-курчат або 35-40-денну птицю з промислового стада з добре розвиненими фабріціевой Бурса. Для цього із загальної кількості курчат, призначених для біопроби, довільно виловлюють 5-10 голів, вбивають, визначають індивідуальні абсолютні маси тіла і бурси, виводять бурсальная індекс (БІ) за формулою:
БІ = Г— 1000,
де Мс - маса фабріціевой бурси (г),
Мт - маса тіла птахів
Курчат, у стаді яких індекс бурси 4 і вище, використовують для постановки біопроби. Зараження курчат з індексом нижче 4 не викликає гострого перебігу хвороби. Визначення бурсальная індексу має важливе діагностичне значення, так як у заражених курчат відзначається зниження даного показника в 3 - 9 разів. p> Перед зараженням у відібраних для біопроби 10-20 птахів відбирають проби сироватки крові для серологічного дослідження (РІД, РН, РНГА, ІФА) на наявність антитіл до вірусу хвороби Гамборо. Досліджуваний матеріал вводять інтраназально в дозі 0,5 мл. p> Біопробу вважають позитивною, якщо у заражених курчат через 2-5 діб розвиваються характерні клінічні ознаки хвороби (діарея, зневоднення, загальне пригнічення, брудно-сірий пір'яний покрив). При розтині хворий і перехворілої птиці відзначають характерні патологоанатомічні зміни. p> Через 15 днів після зараження у залишилися в живих курчат проводять повторне серологічне дослідження сироватки крові для виділення діагностичного (4-кратного) збільшення титру специфічних антитіл і потім їх вбивають з метою встановлення патологоанатомічних змін.
Реакція нейтралізації. Її використовують для ідентифікації вірусу хвороби Гамборо і для виявлення специфічних противірусних антитіл. Реакцію ставлять на курячих ембріонах. У ній використовують нормальну і специфічну гипериммунную сироватки, а в якості антигену виділений на КЕ вірус. Перед постановкою реакції сироватки інактивують у водяній бані при +56 В° С (30 хв), після чого в них додають пеніцилін (1000 ОД/мл) і стрептоміцин (1мг/мл). p> гіперімунні і нормальну сироватки розливають сухими стерильними піпетками по 0,5 мл в стерильні пробірки. Потім в кожну з них по 0,5 мл випробуваного антигену в розведеннях від 10-1 до 10-9. Після струшування пробірки витримують при +37 В° С протягом 30 хвилин. Отримані суміші в дозі 0,2 мл вводять в аллантоісную порожнину 9 - добових ембріонів. Двічі на добу проводять овоскопа. Полеглі ембріони розкривають. На 10-й день для виявлення специфічних змін в органах і тканинах всі ембріони розкривають. Результати РН висловлюють індексом нейтралізації, який визначають за загальноприйнятою методикою. Реакція вважається позитивною, якщо різниця ...
