на фільтрі залишали сушитися на повітрі. (Розчин після промивання виливати не слід, залишали для подальшого випадання феофитина). Екстрагування проводили 4 рази. Отримували 0,7 г феофитина.
.3 Отримання метілфеофорбіда (а) з феофитина
Висушені 0,7 г феофитина розчиняли в суміші 34 см 3 метанолу і 1,4 см 3 концентрованої сірчаної кислоти. Суміш кип'ятили протягом 60 хвилин із зворотним холодильником. Далі в остигнула реакційну суміш прилила 70 см 3 дистильованої води. Випав в осад метілфеофорбід ( а) відфільтрували і відмили водою до рН промивних вод (від метанолу та сірчаної кислоти). Розчинили метілфеофорбід ( а ) на фільтрах в 50 см 3 хлороформі висушили над безводним сульфатом натрію. Розчин випарюють насухо на роторі. Отриману суміш метілфеофорбідов поділяли хроматографією на силікагелі з зміною співвідношення компонентів елюіруются системи (ССI 4: ацетон) від 80:1 до 50:1. За ходом поділу стежили за допомогою TCX (Silufol, СС1 4: ацетон - 4:1). Фракцію, що містить основну речовину, упарітся і отримали метілфеофорбід (а).
.4 Хроматографічне дослідження сполук
Метод ТШХ. Контроль за процесами виділення, розділення і перетвореннями похідних хлорофілу за допомогою ТШХ проводили на пластинках Silufol і Sorbifol. В якості елюентів використовували суміші ССI 4 з ацетоном у співвідношеннях 4:1 (за об'ємом).
Для порівняння хроматографічної рухливості в умовах тонкошарової хроматографії використовували метод свідка. Для цього досліджувана суміш і еталонний зразок хроматографіровалі на одній і тій же платівці, збіги значень R f при близьких концентраціях досліджуваного пігменту і свідка означає хроматографическую ідентичність цих сполук в даній хроматографічної системі.
3 Обговорення результатів
3.1 Отримання метілфеофорбіда (а)
Отримання метілфеофорбіда а з спіруліни через феофитина див. Малюнок 15.
Малюнок 15. Схема отримання метілфеофорбіда а
Для отримання метілфеофорбіда а суху спіруліну екстрагували настоюванням з етанолом і отриманий етанольний екстракт підкисляли розведеною соляною кислотою (7%). Феофитина на відміну від хлорофілів погано розчиняються в етанолі. Тому, коли при підкисленні густого етанольного екстракту спіруліни соляною кислотою, відбувається видалення магнію з координаційної сфери хлорофілів, що утворюються феофитина випадають в осад. Вважається, що, оскільки кислота додається у відносно невеликій кількості, інші речовини осідають з феофитина незначно. Далі екстракт підкисляли соляною кислотою і випали при цьому в осад феофитина обробляли метанолом в присутності концентрованої сірчаної кислоти. Перетворення хлорофілів, що відбуваються при цьому, можна представити таким чином (див. 16)
Малюнок 16 Отримання метілфеофорбіда а з хлорофілів (де С20H39 - фрагмент спирту фитола, етерифікування фітілпропіонатний заступник хлорофілів вищих рослин).
хроматографією і кристалізацією був виділений метілфеофорбід
