з'єднання (синьо-фіолетовий комплекс Руемана):
В
Пролин і оксипролін дають з нінгідрином забарвлений продукт жовтого кольору. Нінгідринова реакція може бути позитивна з деякими амінами, амідами кислот і деякими іншими сполуками. p> Хід визначення. В одну пробірку вносять 5 крапель розчину яєчного білка, в іншу -?-Аланіну і в третю -?-Аланіну. p> Додають в кожну пробірку по 2 краплі розчину нингидрина, нагрівають до кипіння і через 1-3 хв спостерігають появу фарбування.
в. Ксантопотеіновая реакція на ароматичне кільце циклічних амінокислот (реакція Мульдера). Метод заснований на здатності амінокислот і амінокислотних залишків поліпептидів, що містять ароматичне кільце, утворювати при взаємодії із концентрованою азотною кислотою дінітропроізводние з'єднання жовтого кольору. У лужному середовищі вони переходять у хіноїдному структури, що мають оранжеве забарвлення. p> Ксантопротеїнова реакція характерна для фенілаланіну, тирозину і триптофану, які мають ароматичне (бензольное) кільце. Ці амінокислоти або містять їх білки при нагріванні з концентрованою азотною кислотою дають нітросполуки жовтого кольору. p> Наприклад, в реакції з тирозином утворюється дінітротірозін; додавання гідроксиду натрію призводить до утворення натрієвої солі хиноидной структури дінітротірозіна.
білок сироватка кров біохімічний
В
Ксантопротеїнова реакція позитивна з багатьма ароматичними сполуками (бензол, фенол та ін.)
Хід визначення. 1.В одну пробірку вносять 5 крапель розчину яєчного білка, в іншу - фенілаланіну, в третю - тирозину і у четверту - гістидину. p align="justify"> У кожну пробірку додають по 3 краплі концентрованої азотної кислоти, нагрівають до кипіння (обережно! У захисних окулярах!) і спостерігають за появою фарбування.
Вміст пробірок охолоджують під струменем водопровідної води, потім у кожну по краплях додають розчин гідроксиду натрію, поки не почнеться перехід забарвлення.
р. Реакція Миллона на тирозин. Метод заснований на здатності тирозину (як вільного, так і входить до складу білка) при нагріванні з реактивом Миллона утворювати ртутну сіль нітротирозину, забарвлену в пурпурно-червоний колір
В
Ця реакція позитивна також для фенольних сполук.
Хід визначення. В одну пробірку вносять 5 крапель розчину яєчного білка, в іншу - тирозину і в третю - фенілаланіну. У кожну з них додають по 3 краплі реактиву Миллона і обережно нагрівають на водяній бані (не вище 50? С), спостерігаючи за появою фарбування. p> д. Реакція Адамкевича на триптофан. Метод заснований на здатності триптофану в кислому середовищі реагувати з гліоксилової кислотою з утворенням сполуки, пофарбованого в червоно-фіолетовий колір. p> При нагріванні дві молекули триптофану взаємодіють з гліоксилової кислотою з утворенням забарвленого з'єднання
В
В
Для проведення реакції використовують крижану оцтову кислоту, в якій як домішка міститься гліоксилової кислота. В якості водовіднімаючих кошти в реакції використовується концентрована сірчана кислота. p> Хід визначення. В одну пробірку вносять 2 краплі нерозбавленого свіжого яєчного білка, а в іншу - розчин триптофану. p> Додають в кожну з них по 10 крапель крижаної оцтової кислоти і обережно нагрівають до розчинення випав осаду білка в першій пробірці, після чого вміст її охолоджують.
Дуже обережно, по стінці, нахиливши пробірку, подслаівают в кожну з піпетки близько 1 мл концентрованої сірчаної кислоти, стежачи за тим, щоб рідини не змішалися. На кордоні двох шарів виникає характерне забарвлене кільце, яке поступово поширюється на весь розчин. p> е. Реакція Фоля на амінокислоти, що містять слабосвязанних сірку (цистеїн, цистин). Метод заснований на здатності білків, до складу яких входять серусодержащіе амінокислоти (цистеїн, цистин), в лужному середовищі при нагріванні утворювати сульфід натрію, який з плюмбітом натрію дає чорний або бурий осад сульфіду свинцю:
CH2? SH CH2? OH
? ?? NH2 + 2NaOH? CH? NH2 + Na2S + H2O
? ? COOH (CH3COO) 2 + 2 NaOH? Pb (OH) 2 + 2CH3COONa (OH) 2 + 2 NaOH? Na2PbO2 + 2H2OS + Na2PbO2 + H2O? PbS? + 4NaOH
Хід визначення. У три пробірки наливають по 10 крапель розчину ацетату свинцю і по краплях в кожну з них додають розчин гідроксиду натрію до розчинення спочатку утворюється осаду. В одну пробірку додають 5 крапель розчину яєчного білка, в іншу - цистеїну, в третю - метіоніну, суміші кип'ятять 1-2 хв і спостерігають за зміною їх кольору і випаданням осаду. p> ж. Нітропруссідний реакція на серусодержащіе амінокислоти. Метод заснований на здатності сульфіду натрію, що утворюється лужному гідролізі серусодержащих амінокислот, давати із нітропрусидом натрію забарвлене комплексне з'єднання червоно-фіолетового кольору:
H2C? SH H2C? O...
