H
? кип'ятіння?? NH2 + 2NaOH H C? NH2 + 2Na2S + H2O
? ? COOH
цистеїн серінS + Na2 [Fe (CN) 5NO]? Na4 [Fe (CN) 5NOS]
нітропрусид пофарбований натрію комплекс
Хід визначення. В одну пробірку вносять 5 крапель нерозбавленого свіжого яєчного білка, в іншу - розчин цистеїну, в третю - метіоніну. Додають в кожну пробірку по 10 крапель розчину гідроксиду натрію, кип'ятять 3 хв і потім охолоджують їх вміст. p align="justify"> У кожну пробірку додають 2-3 краплі розчину нітропрусиду натрію і спостерігають за появою фарбування.
Оформлення роботи. Після кожної реакції зробити висновок про її специфічності для досліджуваної речовини і присутності відповідних функціональних груп в яєчному білку. Результати оформити у вигляді таблиці, відзначаючи знаками В«плюсВ» чи В«мінусВ» результат реакції. br/>
№ № п/пІсследуемий
Практичне значення роботи. Якісні реактиви (або, як їх часто називають, кольорові реакції) використовуються в клініко-біохімічних лабораторіях, фармацевтичній практиці і біохімічних дослідженнях для виявлення присутності білка і амінокислот в біологічних середовищах, якісного аналізу білкових лікарських засобів, препаратів гідролізатів білків та амінокислот, пептидів і білків на хроматограмах і електрофореграмах. Багато якісні реакції покладені в основу методів кількісного визначення білків та амінокислот. br/>
Робота 2. Якісний аналіз деяких білкових препаратів
Реактиви і устаткування те ж, що і в роботі 1.
Матеріали.
амінопептід або інший гідролізат білків - препарат для парентерального харчування.
Желатиноль (препарат з харчового желатину) або желатин, 1%-ний розчин.
Метод аналізу заснований на використанні якісних реакцій, розглянутих у попередній роботі, для виявлення присутності окремих амінокислот у складі білкових препаратів.
Хід визначення. З білковими препаратами проводять якісні реакції - біуретову, Нінгідринова, ксантопротеиновой, Миллона, Фоля, Адамкевича і нітропруссідний. Для проведення кожної реакції використовують по 5 крапель гідролізату білків і препарату желатину. p align="justify"> Оформлення роботи. Отримані дані оформити у вигляді таблиці, наведеної в роботі 1. p align="justify"> У висновку показати наявність, відповідно до проведеного аналізу, окремих амінокислот і порівняльну повноцінність досліджуваних білкових препаратів.
Практичне значення роботи. Склад амінокислот визначає не тільки властивості білка, але і його поживну і лікарську цінність. Біологічно повноцінними вважаються білки, що містять всі незамінні амінокислоти. Тому становить інтерес наявність саме цих амінокислот в білкових гидролизатах. Гідролізати білків різної природи використовуються в медицині як лікарські препарати для парентерального обміну. У лікувальних цілях застосовуються різні білки плазми, желатину і ін
У практиці контроль якості та кількісний аналіз таких лікарських засобів, як гідролізати білків і препаратів, що містять суміші амінокислот або окремі амінокислоти, грунтуються на якісному і кількісному аналізі конкретних амінокислот. Так, одним з основних показників якості гідролізатів білків є вміст триптофану, яке складає в амінопептід і в фібріносоле близько 0,5 г/л, а в розчинах гидролизина і гідролізату казеїну не менше 0,15 г/л. p align="justify"> Робота 3. Хроматографический метод розділення амінокислот
Хроматографія - один з ефективних і широко застосовуваних у біохімічних дослідженнях методів розділення амінокислот. Найбільш простий і доступною є розподільна хроматографія на папері. Для проведення її використовують систему розчинників, складових рухому і нерухому фази, від правильного підбору яких залежить ефективність розділення амінокислот. Зокрема, застосовують фенол, насичений водою. При обробці хроматографічного паперу цією сумішшю розчинників вода з невеликою кількістю фенолу вбирається в папір і утворює нерухому фазу, а фенол, насичений водою, служить рухомою фазою. p align="justify"> Залежно від напрямку фронту пересування розчинника розрізняють такі види хроматографії: висхідну, спадну, одновимірну, двомірну і радіальну. Розташування окремих амінокислот виявляють шляхом прояви хроматограмм. Для цього висушену папір обробляють розчином нингидрина і потім нагрівають її в сушильній шафі при 100 В° С, тобто проводиться якісна Нінгідринова реакція на амінокислоти, що знаходяться на папері.
Швидкість переміщення амінокислот висловлюють коефіцієнтом Rf, який являє собою відношення відстані, пройденої даної амінокислотою, до шляху, пройденого ф...
