жину полімерної ланцюга відповідає ПГА-синтаза. Вперше це було продемонстровано в системі in vitro при вивченні реакції полімеризації, катализируемой очищеної ПГА-синтазою з R.eutropha. Молекулярний вага полімеру знизився з збільшенням концентрації ферменту. Ця закономірність була підтверджена in vivo. Було продемонстровано, що збільшення експресії ПГА-сінтазного гена з R.eutropha призводить до зниження молекулярної ваги ПГА, синтезованого рекомбінантним штамом Е. coli. Непрямим доказом цього феномена є збільшення числа гранул в клітині при збільшенні активності ПГА-синтази в A.Eutrophus. Однак молекулярна вага ПГА, синтезується рекомбінантним штамом R.eutropha РНВ-4, не залежав від активності ПГА-синтази. Тому автори висунули припущення про існування ланцюг-переносящего фактора (chain-transfer agent), включає в регуляцію довжини ланцюга полімеру. p align="justify"> синтазою, будучи ключовим ферментом в освіті полімерного ланцюга, відповідає і за формування гранул. Як тільки включається синтез полімеру, розчинна форма ферменту переводить мономер-КоА в олігомер, далі фермент-олігомерного комплекс утворює міцелу з локалізацією ферменту на поверхні. Гідрофобні ділянки полімерної ланцюга знаходяться всередині міцели і відокремлені від цитозолю. У цих умовах відбувається швидке подовження полімерного ланцюга і формується гранула. Розмір гранул залежить від кількості ПГА-синтази в клітці, так як концентрація ферменту може визначати кількість зароджуватися гранул. br/>В
Рис.4 Механізм формування гранул ПГА.
Насамперед, розчинна ПГБ-синтаза взаємодіє з зростаючими концентраціями 3-оксібутіріл-КоА в цитоплазмі, приводячи до праймінга ферменту відомим механізмом. Протягом початкової лаг-фази оксибутират олігомери формуються повільно і витісняються з ферменту. Зі збільшенням довжини олігомеру потім формуються міцели. МІЦЕЛИ-подібні частинки дають межу розділу фаз з полімеразою, розташованої всередині. Фермент потім швидко продовжує ПГБ-синтез, витісняючи більшу кількість ПГБ в зростаючу гранулу. br/>
1.4 Організація генів біосинтезу ПГА
полігідроксіалканоат фермент біосинтез ген
В останні роки в результаті досягнень в області молекулярно-генетичних досліджень і детального дослідження системи синтезу полігідроксіалканоатов з'явилися перспективи для отримання рекомбінантних штамів як більш ефективних продуцентів біополімерів. На цьому шляху, орієнтованому на отримання високопродуктивних біосінтетіков ПГА з використанням різноманітних джерел вуглецю, можливі два напрямки. Перше передбачає інтродукцію субстрат-утилізують генів в бактеріальні штами, які синтезують ПГА для розширення їх трофічного потенціалу. Друге використовує гени системи синтезу ПГА для інтродукції їх в швидкозростаючі мікроорганізми, що не синтезують полігідроксіалканоати, але характеризуються широким органотрофним потенціалом. До справжнього моменту гени синтезу ПГ...
