изначають спектрофотометричних у присутності меркаптоетанол при довжині хвилі 340 нм. Метод характеризується високою чутливістю і дозволяє кількісно визначити всі?-амінокислоти, за винятком цистину, проліну і оксипролін [43].
1.4.3 Титриметричні методи
Амінокислоти відносяться до речовин, титрування яких у воді утруднено через слабких кислотно-основних властивостей і/або малої розчинності.
Амінокислоти розчиняють у кислоті оцтової крижаний, і отриманий розчин титрують 0,1 М розчином кислоти хлорної. Титрування може бути проведено з індикатором (кристалічний фіолетовий), так і потенціометрично з використанням скляного електрода в якості індикаторного. Паралельно проводять контрольний дослід.
Методика аналізу характеризується високою точністю визначення, не вимагає використання дорогого устаткування. Однак даний метод має ряд істотних недоліків: використання агресивних, високотоксичних реагентів; для приготування титранту використовують ангідрид кислоти оцтової, оборот якого в РФ обмежений; тривалість приготування титранту (0,1М розчину кислоти хлорної - більше 48 год).
Для кількісного аналізу окремих амінокислот використовують також метод Кьельдаля, кислотно-основне і Йодометрическим титрування.
1.4.4 Електрохімічні методи
Ці методи, як правило, є суворо специфічними, тобто в оптимізованих умовах вони дозволяють визначити лише окремі?-амінокислоти (наприклад, полярографії використовують для аналізу амінокислот або продуктів їх взаємодії, здатних до відновлення або окислення на Мікроелектроди). Так, розроблений спосіб полярографічного визначення триптофану, заснований на електрохімічному відновленні продуктів його взаємодії з формальдегідом [44]. Запропоновано доступна методика полярографічного кількісного визначення метіоніну в таблетках, заснована на здатності метіоніну до окислення.
1.5 Обговорення аналітичного огляду і постановка задачі
Важко переоцінити роль амінокислот у життєдіяльності організму людини. Більшість альфа-амінокислот володіють широким спектром біологічної активності і є вихідними речовинами для синтезу гормонів, ферментів, антитіл і багатьох інших речовин.
Із загальних біохімічних параметрів концентрація амінокислот найбільш адекватний показник якості. По-перше, добавки амінокислот виробниками не практикуються за рахунок їх дорожнечу. По-друге, чим вище концентрація амінокислот, тим коректніше відновлений сік, тим вище його якість. У рослинах їх концентрація досить низька, але вони завжди присутні, так само як і вітаміни. На відміну від останніх, амінокислоти більш стійкі до зберігання, окислення, термообробці. Тому вміст амінокислот може служити показником якості та достовірності яблучного соку. Якщо вони відсутні в напої, тоді це що завгодно, тільки не сік.
Для визначення сумарного вмісту амінокислот в яблучному соку був обраний спектрофотометрический метод з використанням реакції з нингидрином. Метод не вимагає дорогого обладнання, реактивів і високої кваліфікації оператора.
Мета роботи - дослідити можливість визначення сумарного вмісту амінокислот в яблучному соку, як показник якості і достовірності продукту.
амінокислота реакція Нінгідринова яблучний
2. Експериментальна част??
. 1 Вихідні реактиви, матеріали, використовувана апаратура
Спектрофотометр «SHIMADZU UV 2000»;
Електроплитка побутові за ГОСТ 14919-83;
Шафа сушильна лабораторна;
Водяна баня будь-якого типу;
рН -метро-иономер «Експерт - 001»;
Колби мірні по ГОСТ 1770 - 74 виконання 2 місткістю 50, 100 і 250см3;
Піпетки мірні місткістю 1, 2, 5, 10 см3 2 класу точності за ГОСТ 20292-74;
Склянки хімічної місткістю 50 і 100см3 ГОСТ 1770-74;
Воронка лабораторна по ГОСТ 25336 типу В діаметром 56мм і висотою 80 мм;
Вода дистильована за ГОСТ 6709-72;
Нінгідрин ТУ 6-09-0-1384-79;
Фосфатне буфер pH 6,86;
Кислота аскорбінова х.ч;
Кислота соляна за ГОСТ 3118-77, х.ч.
2,6 діхлорфеноліндофенол натрію;
Валін, х.ч;
Гістидин, х.ч;
Ізолейцин, х.ч;
Лейцин, х.ч;
Лізин, х.ч;
Метіонін, х.ч;
Треонін, х.ч;
Триптофан...