грамах; b - Кількість Вільної пара-амінобензоілглутаміновой кислоти, знайденої по калібрувальної крівої, в міліграмах; 25 и 10 - постійні КОЕФІЦІЄНТИ; 3,22 - фактор перерахунку пара-амінобензоілглутаміновой кислоти на фолієву кислоту.
2.5 Вітамін В 12
Якісні Реакції
Розчин вітаміну В 12 має характерну спектр поглінання в ультрафіолеті з максимумами при 278, 361 и 548 нм и коефіцієнтамі поглінання в зазначену точках відповідно 115, 207 и 64, причому коефіцієнт поглінання при 361 нм для препаратів звічайної очищення перевіщує в 2,8-3,4 рази коефіцієнт поглінання при 548 нм.
Кількісне визначення
І.Спектрофотометрічній метод. У Розчин ампулірованніх препаратів в кюветі спектрофотометра (в 1 см товщини) визначаються коефіцієнт поглінання при 548 нм. Вміст вітаміну В 12 в 1 мл випробуваного Розчин обчислюють за формулою. Кількість вітаміну В 12 в мікрограма де Е - спостережуваний коефіцієнт поглінання; 64 - коефіцієнт поглінання для 1% -ного Розчин вітаміну В12, т. Е. При вмісті +1000 мікрограмів в 1 мл; 104 - коефіцієнт перерахунку концентрації вітаміну В 12 з 1% в мікрограмі на 1 мл.
. Колоріметрічній метод. При відсутності спектрофотометра корістуються Фотоелектроколоріметр Із зеленим світлофільтром. Вміст вітаміну В12 у випробуваному зразки визначаються путем вимірювання коефіцієнта поглінання. За знайденому коефіцієнту, користуючися калібрувальної крівої, встановлюють яка Кількість вітаміну В 12 Йому відповідає. Для складання калібрувальної крівої для колориметра ФЕК беруть розчини чистого вітаміну В 12 з вмістом 10, 15, 20, 25 и 30 мкг в 1 мл и визначаються КОЕФІЦІЄНТИ поглінання, користуючися кюветами в 1 см завтовшки.
Відкладаючі по осі абсцис вміст вітаміну В 12, а по осі ординат КОЕФІЦІЄНТИ поглінання, будують калібрувальну криву, по Якій и відраховують, Якій кількості вітаміну В 12 відповідає коефіцієнт поглінання випробуваного бланках.
2.6 Вітамін С
Якісні Реакції
. Розчіняють 0,1 г аскорбінової кислоти в 2 мл води и долівають 0,5 мл Розчин нітрату срібла. Віпадає облог МЕТАЛЕВИЙ срібла.
. Розчин аскорбінової кислоти (0,1 г в 2 мл) в воде залішається безбарвнім від Додавання 1 Краплі Розчин йоду або хлориду заліза.
Кількісне визначення
йодометричним метод Заснований на окісленні аскорбінової кислоти йодом з перетворенням ее в окислених дегідроформа.
Розчіняють 0,3 г препарату (точна наважка) в 25 мл води и тітрують до з'являться незнікаючої жовтого забарвлення 0,1 н. Розчин йоду, 1 мл которого відповідає 0,0088 г аскорбінової кислоти.
Замість йоду можна застосовуваті йодат калію. Наважку препарату з вмістом 0,01 г аскорбінової кислоти розчіняють в 100 мл води. До 10 мл Розчин додаються 5 мл 5% -ного Розчин йодиду калію, 5 мл 2% ної соляної кислоти, 50 мл води и 10 мл 0,004 н. Розчин йодат калію и залішають в темному місці течение 30 хвилин.
Що НЕ увійшов в реакцію вільний йод відтітровують 0,004 н. Розчин тіосульфату натрію (індикатор розчин Крохмаль). 1 мл 0,004 н. Розчин йодат калію відповідає 0,000352 г аскорбінової кислоти. Розраховують за формулою (а-b) 0,000 352, де а - Кількість Розчин йодат калію в мілілітрах, b - Кількість Розчин тіосульфату натрію в мілілітрах. Аскорбінову кислоту можна візначаті по Реакції Відновлення 2,6-діхлорфенол-індофенолу, альо цею метод малопрійнятній при контролі рецептури.
2.7 Вітамін РР
Якісні Реакції
. Розчіняють 0,01-0,02 г препарату при нагріванні в 3 мл води. До теплого Розчин долівають 3 Краплі оцтової кислоти и 1 мл 5% -ного Розчин ацетату МІДІ. Віпадає облог синього кольору.
. У розчіні нікотінової кислоти від реактиву Зонненшейна (фосфорно-молібденова кислота) віпадає жовтий облог, а от реактиву Драгендорфа червоний облог.
. Нікотінова кислота и ее АМІД дають з 2,4-дінітрохлор-бензолом СОЛІ пірідінію, Які при Дії лугів розщеплюються з утвореннями похідніх глутаконового альдегіду, забарвленіх у жовто-червоний колір.
У 100 мл води розчіняють 10 мг нікотінової кислоти; 5 мл Розчин віпарюють насухо на водяній бані в стаканчику ємністю 30 мл, потім додаються 1 мл 10% -ного спиртового Розчин 2,4-ді-нітрохлорбензола и после 2-Годіна стояння при кімнатній температурі віпарюють вновь насухо на водяній бані и трімають ще в течение 10 хвилин при тій же температурі. После охолодження до 25 ° до залишком долівають 10 мл охолодженя до 10 ° 0,1% -ного спиртового Розчин їдкого на...
