м адермін дает червоне забарвлення.
. Змішують 1 мл 0,01% -ного Розчин з 1 мл 0,04% -ного Розчин 2,6-діхлорхінонхлоріміда в абсолютному алкоголі и потім додаються 1 краплю Розчин аміаку - з'являється синє забарвлення.
Кількісне визначення.
. Калоріметрічне визначення підстав на перетворенні четвертінної основи в фіолетовий колір з'єднання типом кар-бопірідінціаніна, Пожалуйста калоріметрірують, порівнюючі зі стандартом.
. Солянокислий сіль адермін можна візначаті тітруванням Лужний розчин при індікаторі бромтимолового синього; для перевіркі відтітровану рідіну вновь тітрують 0,1 н. Розчин нітрату срібла.
2.4 Фолієва кислота
Якісні Реакції
. Одержании азобарвника.
. Спектр поглінання в ультрафіолеті (при рН 11) має максимум при 255, 282 и 365 нм.
Кількісне визначення
При відновленні фолієвої кислоти в солянокислом розчіні цінкової пилом в чіслі других продуктов відщеплюється пара-аміно-бензойна кислота, якові диазотируют нітрітом натрію. Отримавших сіль діазонію поєднується з N- (1-нафтил) -етілендіамінді-гідрохлорідом у прісутності сульфамат амонію NH2SO2 ONH4.
При цьом спостерігається фіолетове забарвлення Розчин, інтенсівність якої пропорційна концентрації и вимірюється в фотоколоріметрі або в спектрофотометрі.
Потрібні реактиви: 1) розчин желатин (1,5 г желатину и 0,1 г бензойної кислоти розчіняють в 100 мл води), 2) 10% -ний розчин соляної кислоти, 3) 0,1 % -ний розчин нітріту натрію, 4) 8% -ний розчин сечовіні й 5) 0,1% -ний розчин N- (1-нафтил) -етілендіаміндігідрохлоріда.
Точно 0,05 г пара-амінобензойної кислоти з температурою плавлення 186-187 ° відважують в стаканчику ємністю 15-20 мл, розчіняють в 96% -ному етиловий спірті, перелівають в мірну колбу ємністю 50 мл, стаканчик промівають 3-4 рази спиртом (загальна Кількість спирту 25 мл), розчин доводящего водою до Мітки и перемішують. З цього Розчин відбірають 1 мл в колбу ємністю 250 мл, додаються 175 мл води, 45 мл 10% -ного Розчин соляної кислоти, 2,5 мл Розчин желатину, що доводять до Мітки водою и перемішують. У 1 мл Розчин містіться 0,004 мг пара-амінобензойної кислоти.
У Чотири Колбі ємністю 15-20 мл влівають піпеткою 1, 2, 3 і 4 мл приготовання Розчин и доводящего ОБСЯГИ Розчин в Кожній колбі водою до 5 мл и додаються по 0,7 мл 10% -ного Розчин соляної кислоти, по 1 мл 0, 1% -ного Розчин нітріту натрію, добро перемішують и залішають на 5 хвилин. Потім в шкірних колбу додаються по 1 мл 8% -ного Розчин сечовіні, перемішують и вновь залішають на 5 хвилин. После цього в шкірних колбу додаються по 1 мл 0,1% -ного Розчин N- (1-нафтил) -етілендіаміндігідрохлоріда, по 1,3 мл води, перемішують, залішають на 10 хвилин и потім визначаються забарвлення Розчин" електрофотоколоріметром з світлофільтром 550 нм. Для Отримання стандартної крівої на осі ординат завдаючи Таблица Показання гальванометра, а на осі абсцис - Кількість міліграмів и з'єднують прямою лінією точки Перетин перпендікулярів, відновленіх з відповідніх точок осей графіка.
Визначення Загальної кількості (зв'язаними и вільною) р-амінобензоілглутаміновой кислоти в препаратах.
точно наважку препарату (0,049-0,050 г) в стаканчику ємністю 15-20 мл змочують декількома Краплю води и розчіняють в 0,1 н. розчіні їдкого натру. Розчин перелівають в мірну колбу ємністю 50 мл, стаканчик промівають кілька разів 0,1 н. Розчин їдкого натру, зліваючі промівну рідіну в ту ж колбу. ОБСЯГИ Розчин доводящего 0,1 н. Розчин їдкого натру до Мітки и добро перемішують. З отриманий розчин відбірають 1 мл в мірну колбу ємністю 100 мл, додаються 75 мл води, 18 мл 10% -ного Розчин соляної кислоти, 1 мл Розчин желатину, що доводять до Мітки водою и перемішують (розчин А).
До 75 мл Розчин в конічній колбі ємністю 150 мл додаються 0,5 г цинкового пилу и залішають на 15 хвилин при частому перемішуванні. Розчин фільтрують через сухий фільтр в суху колбу, відкідаючі Перші 15-20 мл фільтрату. До 2 мл фільтрату в колбі ємністю 15-20 мл додаються 3 мл води, 0,7 мл 10% -ного Розчин соляної кислоти и далі надходять, як зазначилися при отріманні стандартної крівої.
Визначення Вільної п-амінобензоілглутаміновой кислоти.
До 2 мл Розчин А в колбі ємністю 15-20 мл додаються 8 мл води и далі надходять, як описано при візначенні Загальної кількості пара-амінобензоілглутаміновой кислоти. Вміст фолієвої кислоти в грам (х) обчислюють за формулою
де а - загальна Кількість Вільної та зв'язаної пара-амінобензоілглутаміновой кислоти, знайденої по калібрувальній крівій, в мілі...
