stify"> Малюнок 7 - Бактеріальні клітини спіралеподібних форм Helicobacter pylori, виявлення іммуноцітохіміческіе методом , в біоптаті слизової обол ?? Чки шлунка. Стрілкою відзначена клітина, імовірно перебуває у процесі нерівномірного поділу. Збільшення 1000х.
Можливо, що в результаті дроблення великий спіральної бактеріальної клітини може вийти спіраль поменше («великий брат») і коки («маленький брат»).
.6 іммуноцітохіміческіе метод діагностики
.6.1 Авидин-биотиновой метод
Принцип іммууноцітохіміческого методу схожий з імуноферментним аналізом. Зокрема, авидин-биотиновой метод заснований на високій афінності авідіна або стрептавідину до біотину (константа дисоціації 10 - 19 М). Авидин - це глікопротеїн з молекулярною масою 68 кД, що має високу спорідненість до біотину - вітаміну з малою молекулярною масою. Висока чутливість авидин-биотиновой методу обумовлена ??хімічною структурою авідіна, що має чотири ділянки для зв'язку з біотином. Однак через молекулярної орієнтації біотин-зв'язуючих ділянок, насправді зв'язується не менше 4 молекул біотину. Метод включає наступні основні етапи інкубації: з немічених першими (специфічними) антитілами; з другими біотінілірованние антитілами; з комплексом авідіна з біотінілірованние пероксидазою, з подальшим проявом пероксидази хрону субстратом діамінобензідіном [47].
Рисунок 8 - Авидин - биотиновой метод
Таким чином, принцип імуноцитохімічного методу заснований на високо специфічному зв'язуванні антитіл, які надалі можна візуалізувати шляхом хімічної реакції, з антигенами клітинної стінки H.pylori . В результаті проведеної іммуноцітохіміческіе реакції тільки ті бактеріальні клітини, в тому числі і коки, які мають антигени, специфічні для H.pylori , матимуть характерне фарбування.
іммуноцітохіміческіе виявлення різних форм H. рylori (спіралеподібних і кокових) досить рідко застосовується в медичній практиці, зважаючи на свою дорожнечу і труднощі пробопідготовки. При цьому він має незаперечну цінність при контролі ефективності ерадикації, тому що при фарбуванні цитологічних мазків рутинними методами, неможливо відрізнити кокові форми Н. pylori від коків інших видів [48].
.6.2 Метод рідинної імуноцитохімії
Останнім часом активно розвивається метод рідинної цитології (ЖЦ). Суть методу полягає в тому, що клітинний матеріал не переноситься відразу на скло, а змивається в підготовлений стабілізуючий розчин і відправляється в лабораторію. В умовах лабораторії за допомогою спеціального обладнання відбувається приготування стандартного цитологічного препарату з надісланої суспензії клітин. В силу розподілу матеріалу на предметному склі у вигляді моношару знижується кількість хибнонегативних результатів цитологічного дослідження.
На матеріалі слизової оболонки шлунка метод був вперше застосований для діагностики доброякісних і злоякісних уражень шлунка в дослідженні Нікітіної Л.В. і співавторів «іммуноцітохіміческіе дослідження та рідинна цитологія в діагностиці уражень шлунка», опублікованому в 2012 році. [49]
У дос...
