.3 Підтримання культури бактерій і підготовка інокуляту
Для вирощування чистої культури С. acetobutylicum користуються запасом суперечка бактерії, що заготовлюються зазвичай на шестимісячний (і більше) період роботи заводу.
Заготівлю суперечка проводять на 6%-ном заторі кукурудзяної або житнього борошна шляхом масового висіву. Для цього близько 100 пробірок зі свіжим стерильним затором засівають культурою бактерії і весь цикл бродіння, що закінчується утворенням спор, проводять при 37 ° С. Готувати суперечки можна і способом розливу. Для кожної нової заготовки використовують суперечки, отримані з культур, які дали у виробництві найкращі результати бродіння. Перша половина бродіння проводиться в одному великому скляній посудині, з якого бражка розливається потім у стерильні пробірки, в яких процес закінчується утворенням спор. Пробірки із суперечками запаюють на газовому пальнику і ставлять в термостат. Через 48 - 60 год бродильні гази спускають, пробірки знову запаюють і зберігають при кімнатній температурі. Після двомісячного зберігання партія спір не підлягає перевірці шляхом пробного бродіння. Задовольняють технічним умовам суперечки визнаються придатними для виробництва і на них складають паспорт.
Приготування необхідної кількості чистої культури бактерій для виробництва складається з ряду послідовних пересівів, які ведуться в усі збільшуються обсягах затору. Розведення культури починається з посіву спорами в апараті чистої культури (АЧК) обсягом 10 л. Через 28 год бродіння вміст АЧК стерильно передається у великій інокулятор (БІН) на 3,5 м 3 затору. Стерильний затор для БІН беруть безпосередньо з виробництва в гарячому стані, охолоджують його в Біне або в холодильнику. З інокулятора культура бактерій передається в ферментатор-активатор виробничої батареї з дотриманням умов стерильності.
Для процесу безперервного ацетоно-бутилового бродіння запропонована додаткова стадія. Це апарат чистої виробничої культури (АЧПК), ємністю 200 м 3, який засівається з Біна, а через 10 - 12 год бродіння вся культура з нього переводиться в першу ферментатор виробничої батареї і відразу починається її завантаження затором.
.4 Бродіння
Для розуміння специфіки ацетоно-бутилового бродіння корисно спочатку розглянути закономірності періодичного процесу, хоча в промисловості воно давно ведеться в основному напівбезперервним і безперервним методами. Уже в перші години після інокулірованія затору активної культурою бактерій спостерігається бродіння, помітне по бульбашок газу, що піднімаються до поверхні середовища. Газовиділення досягає максимуму звичайно через 24 - 26 год, спадаючи до кінця бродіння. У період максимального газовиділення відбувається характерне розшарування субстрату - на поверхню піднімається пухкий слизовий шар, в нижньому шарі залишається каламутна опалесцююча рідину. Вся середовище набуває жовтувате забарвлення. Це явище у виробництві іменується «підйомом» бражки і характеризується як одна з ознак нормального бродіння. До кінця бродіння піднялася тверда частина субстрату осідає на дно. Поряд з газовиділенням, характерним для ацетоно-бутилового бродіння, є форма кривої титруемой кислотності. Розвиток бактерій характеризується швидким наростанням титруемой кислотності, що досягає макс...
