рилізацією значення рН висівок доводять до 5,5, зволожують висівки гарячою парою так, щоб їх вологість становила 70 - 80%. Далі субстрат охолоджують до 30 - 36 С і інокуліруют спорами штаму, малочутливих до присутності Fe3 +. Температура не повинна бути вище 28 С. Крохмаль висівок осахарівается ферментами гриба, але додавання готових амілаз до субстрату збільшує вихід продукту. Інокулював висівки розміщують в лотках на глибину 3 - 5 см. через 5 - 8 днів Коджи збирають і переносять в інокулятор для екстракції лимонної кислоти водою. Забруднення субстрату слідовими металами є проблемою в процесі Коджи, так як їх важче видаляти, ніж в інших варіантах процесу. Тому проводять селекцію і використовують штами, стійкі до слідові металам. До субстрату також додають HCF або Сu +2.
Рис. 8. Технологічна схема отримання лимонної кислоти з меляси поверхневим способом (жидкофазная ферментація)
1 - цистерна для меляси, 2 - відцентрові насоси, 3 - реактор для розбавлення меляси, 4 - стерилізатор, 5 - бродильна камера, 6 - збірка зброджуваний розчинів, 7 - нейтралізатор, 8, 10 - нутч-фільтри, 9 - расщепитель, 11 - збірник-монтежю, 12 - вакуум-апарат, 13-дисольвер, 14 - фільтр-прес, 15 - кристалізатор, 16 - приймач, 17 - сушарка, 18 - готова продукція, 19 - збірник фільтрату .
8. Глибинний спосіб ферментації
На сучасних заводах прийнято глибинне культивування гриба, що характеризує більш високою продуктивністю, ніж перший процес. При цьому інокулював середу наливається добре аеріруемие ферментери з перемішуванням і контролем аерації. Глибинна ферментація можлива в різних варіантах: періодичному з підживленням і безперервному.
Процес отримання лимонної кислоти при глибинному культивуванні гриба A.niger проводять в ферментаторах об'ємом 100 м 3. В якості посівного матеріалу використовують підріс міцелій, отриманий в посівних апаратах об'ємом 10 м 3.
Розчин меляси і для пасивного, і для виробничого ферментаторів готують також, як і при поверхневому культивуванні, тільки вихідний розчин меляси для глибиною ферментації повинен містити не більше 4% цукрів. По ходу ферментації, коли концентрація цукру різко знижується, проводять дробове додавання стерильного мелассного розчину, що містить 25 - 28% цукрів. Додають цей розчин в такій кількості, щоб концентрація цукрів у ферментаторі становила 12 - 15%.
В посівної апарат, заповнений живильним середовищем, засівають суспензію конідій, яку попередньо витримують 5 - 6 годин в термостаті при 32 С. Культуру вирощують при 34 - 35 С при постійному перемішуванні і аерації. У процесі культивування строго контролюють режим подачі повітря в ферментатор, витрата якого збільшують до кінця ферментації майже в 10 разів. О 2 повинен знаходитися як мінімум в концентрації 20 - 25% від насичення. У період інтенсивного спінювання середовища невеликими порціями вводять хімічний піногасник (олеїнову кислоту). Процес підрощування міцелію закінчують через 30-36 год, коли зміст кислот в культуральній рідині досягає 1-2%. Підросла міцелій передають для засіву живильного середовища у виробничий ферментатор.
Процес кислотоутворення в ферментаторі триває 5-7 діб при безперервній аерації і температурі 31-32 0 С. Витрата повітря поступово збільшують з 400 м 3 / год на початку процесу до 220...
