justify"> Для ціх цілей Шмідт застосовував колонку розміром 20x2 см, Наповнення сефадексом А - 25 (Сl-). После попередньої ОБРОБКИ 0,5 М розчин їдкого натру, 0,5 М розчин соляної кислоти й 0,1 М розчин хлориду натрію колонка наповнювалась суспензією іоніту в 0,1 М розчіні хлориду натрію. Потім Використана Наступний східчастій Градієнт:
) 0,50 М розчин хлориду натрію;
) 1,25 М розчин хлориду натрію в 0,01 М розчіні соляної кислоти;
3) 1,50 М розчин хлориду натрію в 0,01 М розчіні соляної кислоти;
4) 2,0 М розчин хлориду натрію в 0,01 М розчіні соляної кислоти.
Перед качаном процесса колонку промівалі 5 мл дістільованої води. У процессе поділу збирать Фракції по 5 мл. Ізомерні хондроітінсульфаті НЕ піддаваліся поділу таким методом, и смороду елюювалісь одним піком.
. 7 Хроматографія на Гелі сефадексе ї Розподіл по молекулярних масах
Існують хвороби, при якіх порушується обмін аніоногенніх глікозаміногліканів, и деякі аніоногенні глікозаміноглікані могут акумулюватіся в органах и тканинах або могут відалятіся Із сечею. Є дані про том, что ЦІ глікозаміноглікані відрізняються від своих аналогів здорових організмів по Ступені полімерізації. Більшість методів, відмінніх від хроматографії, займає занадто много годині, щоб мати практичність Цінність. Зразок хондроітін - 4-сульфату при хроматографуванні на колонці Із сефадексом G - 200 давав широкий пік, что відповідає безліч полімерам, Які є у зразки. Із цієї Фракції віділялі вузькі Фракції ї визначавши молекулярні масі з єднань у Кожній з них будь-яким підходящім методом, например таким, як метод визначення коефіцієнта діфузійного осадженим (результати зненацька показали, что ЦІ Фракції НЕ занадто відрізняються по молекулярних масах), и вічерчувалі залежність утрімуваніх обсягів від знайденіх молекулярних мас. Всі Вищевказаними необходимо здійсніті у зв язку з тім, что відсутня ідентічність залежності логарифма молекулярної масі від відносного годині втрімання, отріманої ЦІМ методом, и аналогічного каліброваного графіка будь-которого стандартного Білка. Перевага цього методу Полягає в тому, что дерматансульфат, хондроітін-б-сульфат и гепарітінсульфата такоже підкоряються цієї залежності
6. ! Застосування органічніх реагентів у рідінній хроматографії для поділу глікопротеінів и глікопептідів
Методи хроматографічного поділу глікопротеінів Фактично НЕ відрізняються від методів, використаних у химии білків и пептидів. Такоже є ряд білків, Які у звічайна змісті НЕ вважаються глікопротеінамі, хоча смороду містять одне або немного глікозідніх залишків. Звічайна, існує безліч методів, за помощью якіх могут розділятіся Різні глікопротеіні. З подивимось хроматографіста, тут не треба детально їх опісуваті. З Іншої Сторони є хроматографічній метод, спеціфічній для структурних аналізів глікопротеінів и глікопептідів. Спеціфічність заснован на віборі підходящої системи детектування, а не властіво методу поділу.
вуглеводи и їх ацил- и алкілоксіпрпохідні взаємодіють Із фенолом и сірчаною кислотою, даючі жовто-жовтогарячій хромоген, что проявляє абсорбційній максимум при довжіні Хвилі 485 нм для пентоз або при 489 нм для гексоз. Крім того, у работе повідомлялося, что амінокислоти ї Білки НЕ заважають Цій Реакції. Тому що цею метод є пробачимо и чутлівім и не требует спеціального очищення после того, як змішані реагенти, вікорістані для Утворення жовтого хромогенним; ВІН БУВ избран для АНАЛІЗУ Великої Серії зразків, отриманий при протеолітичних віварюваннях глікопептідів.
7. ! Застосування рубіановодневої кислоти в трібутілфосфаті, як нерухомости фаза в колоночній хроматографії
Різні хелатоутворюючі реагенти, Такі як дітізон, оксіхінолін, купферон, найбільше часто Використовують для групового концентрування іонів металів з вод. Недоліки екстракційніх методів концентрування полягають у значній розчінності хелатоутворюючіх реагентів и їхніх комплексів у воде, необхідності повторень екстракції з більшіх обсягів (500-750 мл) аналізованої проби, у результате чего Виходять значні ОБСЯГИ екстрактів, з якіх реекстрагують елементи, або відганяють органічний Розчинник. Це подовжує годину АНАЛІЗУ, ускладнює его виконан, зменшує точність визначення мікроелементів.
способ концентрування іонів кобальту, МІДІ, цинку, свинцю, кадмію й марганцю методом екстракційної хроматографії описів по розробка В. А. Лугініна. ВІН складається в пропущенні через хроматографічну колонку аналізованої проби води ОБСЯГИ від 0,5 до 10 л Із рН=7,0 зі швідкістю 2 л/рік. Колонка Заповнена ацетилцелюлозу з висота прошарку, на якові нанесена органічна фаза - розчин дитизона в четіріхлорістому вуглеці.
