ься можуть обидві. Було встановлено, що ОІ-лецитини (1, 3-ДІАЦ-sn-глпцеро-2-фосфохоліньг) гідролізуються ФЛА2 з отрути змії Crotalus adaincniteus, хоча і з порівняно низькою швидкістю. ФЛА2 НЕ гідролізують амідну зв'язок сфінголіпідів. Тіолові аналоги фосфатидилхолін є хорошими субстратами, що дозволяє стежити за процесом гідролізу спектрофотометрично. Де Хаас і ін встановили, що негативний заряд на фосфатної групі не є абсолютним вимогою до субстрату.
Завдяки стерическую і позиційної специфічності, ФЛА2 - цінний інструмент в хімії та біохімії ліпідів. Їх використовують для встановлення позиційного розподілу жирних кислот при аналізі фосфогліцеридів, для розділення рацемічних сумішей ліпідів, а також у синтезі ліпідів для отримання фосфогліцеридів зі змішаним складом жирних кислот.
Субстратна специфічність клітинних ФЛА2 до цих пір ще повністю не окреслена, проте накопичені дані щодо будови субстратів для ФЛА2 клітин крові та імунної системи, зокрема, доведена специфічність цих ферментів до Фосфатидилхолін, що містить у sn-2-положенні гліцерину арахідоната.
2.4 Інгібітори ФЛА2
2.4.1 Неконкурентні інгібітори
Зниження каталітичної активності ФЛА2 може відбуватися внаслідок порушення рівноваги на одній або на декількох стадіях ферментативної реакції, тому відомі інгібітори цього ферменту можна умовно розділити таким чином.
а) Зв'язування інгібітором ферменту (Е) може зрушувати рівновагу Š↔ Е * вліво і знижувати концентрацію каталітично активного Е *. Це відбувається при додаванні до Везикули субстрату везикул негідролізуемого аналога субстрату, з яким фермент зв'язується, але не може швидко десорбувати. Необхідність наявності іонів кальцію при зв'язуванні ФЛА2 з міжфазною поверхнею дає підстави відносити до числа інгібіторів хелатирующие агенти, наприклад EDTA.
б) Ліпофіл'ние з'єднання змінюють фазові властивості субстратів і зменшують щільність заряду на міжфазної поверхні, зрушуючи рівновагу Š↔ Е * вліво. Було показано, що такі зміни викликають органічні розчинники, детергенти, спирти, а також катіонні амфіфіли, фенотіазини та місцеві анестетики різної хімічної природи. Інші інгібітори - жирні кислоти, мепакрін, аристолохова кислота - також впливають на стадію зв'язування-десорбції Š↔ Е *, не зачіпаючи каталітичної дії ферменту на міжфазній поверхні.
в) Деякі типи неспецифічного інгібування. За певних умов швидкість гідролізу під дією ФЛА2 фосфоліпідів, які зазнали перекисного окислення, значно збільшується. Тому антиоксиданти вважаються потенційно здатними знижувати активність ферменту. Білки типу ліпокортину і калпактіна солюбілізіруют фосфоліпіди міжфазної поверхні, тим самим знижуючи активність ФЛА2. Водорозчинні аніони, такі як гепарин, інгібують зв'язування ФЛА2 з міжфазною поверхнею шляхом блокування аніонного ділянки зв'язування ферменту.
г) Ковалентні модифікації амінокислотних залиш...
