сирої вага)
В даний час інтенсивно розробляється концепція «їстівних вакцин» на основі трансгенних рослин, чиї плоди, листя і насіння годяться в їжу. У разі успіху відпадає потреба в дорогої очищенню антигенів, яка необхідна при створенні вакцин для парентерального введення. Різні субодиничні вакцини експресувати в рослинах і для багатьох з них показана імуногенність при оральному введенні людям і тваринам. Антигени, експресуються в рослинах, захищені рослинними клітинними стінками від протеолізу при проходженні травного тракту і можуть бути легко доставлені до клітин слизової оболонки кишечника, відповідальним за мукозно систему імунітету.
Дві вакцини, синтезовані в рослинах картоплі вже пройшли стадію клінічних випробувань - це субодиниця В термолабільного токсину (LT-B) Ентеротоксігенние штаму E.coli (ETEC) і капсидний білок вірусу Норфолк (NVCP). Ці антигени, виділені з двох важливих кишкових патогенів, можуть бути ідеальними їстівними вакцинами, оскільки обидва мають мультімерной структуру і стійкі до перетравлювання в кишечнику людини. Кожен з цих білків накопичувався у великих кількостях в бульбах картоплі і правильно збирався в олігомери. Клінічні випробування рекомбінантної вакцини LT-B показали, що поїдання добровольцями сирих бульб картоплі, що містять 0.3-10 мг LT-B, призводило до утворення мукозних і системних антитіл з високими титрами. Значний прогрес досягнуто у використанні насіння кукурудзи для експресії їстівних вакцин. Субодиниця LT-B експресуватися в насінні на рівні до 0.1% від сирої ваги і володіла імуногенними і захисними властивостями при поїданні мишами. Асоціація з крохмалем полегшує очищення антигену із зерен кукурудзи, і крім того забезпечує термостабільність антигену і його стійкість до протеолітичної деградації при попаданні в шлунково-кишковий тракт. Остання обставина важливо при оральному введенні антигену. На основі насіння кукурудзи створена вакцина, що захищає свиней від вірусного гастроентериту. Рівень експресії білка для створення їстівних вакцин повинен бути досить високий. Цього можна досягти, наприклад, при трансформації пластид, що дає до 25% цільового білка від загального розчинного білка клітин.
Іноді антигени зшивають з іншими білками для полегшення детекції, наприклад, з геном? - глюкуронідази (GUS). За GUS-активності Мохни легко визначити рівень експресії антигенів в трансформанта. В обох випадках білки зберігали свою імуногенність.
Субодиниця холерного токсину (CTB) ефективно використовують для зшивання з іншими білками-антигенами і подальшої трансформації рослин. Наприклад, була описана експресія епітопу HVR1 вірусу гепатиту С, зшитого з CTB, на основі вірусу тютюнової мозаїки. Рослини тютюну, інокулював цим вірусом, синтезували функціональний білок CTB-HVR1, реагує з моноклональними антитілами проти HVR1, а також з сироваткою крові людей, інфікованих вірусом гепатиту С. Інші дослідники зшили епітоп ротавирусного ентеротоксину NSP4 з CTB і трансформували отриманої конструкцією картоплю. Ця робота була продовжена створенням мультикомпонентного вакцини, що складалася з білка NSP4-CTB і фімбріального антигену з ентеротоксічного штаму E. coli, злитого з субодиницею холерного токсину CTA2. Два цих білка збиралися в структури, подібні цілого холерного токсину, і зберігали здатність зв'язуватися з рецепторами кишечника. У орально імунізованих мишей вироблялися антит...
