вної рожевого забарвлення індикатора.
Реактиви та обладнання: ступка з товкачиком, пробірки, піпетки, 1% розчин сечовини, 0,02% спиртовий розчин фенолфталеїну, дистильована вода, екстракт ферменту, робочі розчини токсикантів.
Приготування екстракту уреази
Очистити 3-4 кавунових насіння від шкірки і розтерти ядра в ступці з 10 мл води. Даний екстракт злити в пробірку і використовувати для проведення дослідів.
Хід досвіду
Для дослідів взяти 2 мл суспензії ферментативного препарату. У пробірку додати 1 мл води або токсиканта (солі важкого металу), струснути і додати 2 мл розчину сечовини. Слід підкреслити, що необхідно додавати реагенти в тій послідовності, про яку сказано вище. Потім у пробірку додати 2-3 краплі спиртового розчину фенолфталеїну, залишити при кімнатній температурі на 3-5 хв. За інтенсивністю з'являється забарвлення фенолфталеїну судять про інгібуванні ферменту. Якщо забарвлення з'являється, значить, уреаза зберігає свою активність, оскільки виділяється аміак, а якщо забарвлення індикатора не з'являється, значить, реагент інгібує фермент. У дослідах використовуються різні концентрації токсикантів. Готувати розчини солей і фенолу необхідно з урахуванням розбавлення при проведенні досвіду. Токсиканти в одних концентраціях інгібують фермент, в інших немає. Дослідницький компонент експерименту полягає в знаходженні такої концентрації фактора, при якій починається інгібування уреази.
Вплив катіонів важких металів на активність ферменту
Поступаючи в біосферу, важкі метали активно включаються в різні міграційні цикли еко- і геосистем і становлять потенційну небезпеку для всього живого. Сполуки важких металів здатні зберігати токсичність практично нескінченно, оскільки при їх перетворенні метал залишається без змін. Катіони металів, що надходять в організм людини або тварини з навколишнього середовища, утворюють міцні зв'язки з карбоксил-аніонами і часто викликають розриви іонних взаємодій між іонізованими бічними радикалами амінокислотних залишків у глобуле, що призводить до втрати активної структури білка. Вони знімають електричну поляризацію білка, зменшуючи його розчинність. Внаслідок цього знаходиться в розчині білок випадає в осад. Потрапляючи в клітини, хром, як і багато інші важкі метали, дезактивує ферменти, взаємодіючи з SH - групами білків - складових ферментів.
Вивчення впливу солей важких металів на активність уреази. В якості токсиканта треба використовувати розчин двухромовокислого калію К2Сr2O7 в різних концентраціях (10-6, 10-7, 10-8, 10-9 моль/л). Експеримент слід проводити за вищенаведеною методикою.
Висновки і пропозиції
Неконтрольоване забруднення навколишнього середовища важкими металами загрожує здоров'ю людей.
У зв'язку з цим необхідно максимально знизити рівень надходження важких металів в організм людини. Зокрема, шляхом отримання продукції рослинництва (їжі для людини і сільськогосподарських тварин, які в свою чергу також є джерелом продуктів харчування для людини) вільної від забруднення важкими металами. Отже, необхідно проводити хімічний аналіз грунтів на утримання кожного із найнебезпечніших металів.
Для отримання продукції рослинництва, вільною від важких металів, на грунтах з підвищеним їх вмістом необхідно:
провести агрохімічне обстеження ріллі, визначити вміст важких металів у грунті
зіставити вміст важких металів з вмістом калію і кальцію
провапнованих кислі грунти
підвищити вміст обмінного калію в грунті
виключити застосування мінеральних добрив, що містять важкі метали
підібрати культури, мінімально споживають ці елементи; на сильно забруднених полях можна вирощувати культури для технічної переробки
періодично проводити контроль продукції на вміст важких металів
Крім того, знизити вплив важких металів на здоров'я населення можна шляхом вирішення наступних завдань:
. організація точного та оперативного контролю викидів важких металів в атмосферу і воду;
. простежування ланцюгів міграції важких металів від джерел до людини;
. налагодження широкого та дієвого контролю (на різних рівнях, аж до побутового) вмісту важких металів у продуктах харчування, воді та напоях.
. проведення вибіркових, а потім і масових обстежень населення на вміст важких металів в організмі.
Подібні заходи застосовуються в ряді розвинених країн. У США реалізується національна програма масових обстеження діте...
