уваній сироватці крові від норми і про можливі його причини. p align="justify"> Практичне значення роботи. Сироватка крові містить суміш білків, різних за фізіологічним значенням, структурі та фізико-хімічними властивостями (більше 100 різних білків плазми крові). Нормальний вміст білка в сироватці крові (нормопротеінемія) становить 65-85 г/л. Визначення загального білка в сироватці крові знаходить широке застосування в практичній медицині, тому що по зміні його нормального змісту можна судити про різні порушення в організмі. Підвищений вміст білка (гіперпротеїнемія) відносно рідко: при згущенні крові через втрату рідини (тривала блювота, посилене потовиділення, холера, важкі опіки і т.п.), при деяких хронічних запальних процесах внаслідок утворення антитіл (ревматизм, поліартрит). Знижений вміст білка в крові (гіпопротеїнемія): при недостатньому надходженні білка з їжею (голодування, порушення прохідності кишкового тракту), при порушенні утворення білка в органах (при ураженні печінки хімічними речовинами, пухлинами, мікроорганізмами і т.д.), при втраті білка організмом (кровотечі, підвищена проникність судин, захворювання нирок, вагітність і т.д.).
У фармацевтичній практиці кількісні методи визначення білка необхідні для контролю білкових лікарських засобів (вакцин, сироваток, ? - глобуліну, білкових препаратів крові і т.д.).
4. Склад і властивості складних білків
Складні білки є представниками змішаних макромолекул, які містять як мінімум два різних хімічних компонента, з'єднаних ковалентними або слабкими (іонними, водневими, вандерваальсовимі) зв'язками. До складних білків відносять кофакторпротеіди (гемпротеіди, хлорофіллпротеіди, флавопротеиди та ін), глікопротеїди і протеоглікани, ліпопротеїди і протеоліпіди, Металопротеїни, фосфопротеіди і Нуклеопротеїни. p align="justify"> Особливість будови цих макромолекул дозволяє використовувати при виявленні і кількісному визначенні їх в біологічному матеріалі методи аналізу як на білковий фрагмент молекули, так і на простетичної групу. Оскільки остання специфічна для кожного класу складних білків, реакції на неї застосовуються частіше. br/>
Робота 9. Хімічна природа гемпротеідов
До гемпротеідам відносять гемоглобін, міоглобін, цитохроми і ферменти - каталазу і пероксидазу. Вони складаються з білкової частини і гема, що представляє собою тетрапіррольних з'єднання, пов'язане з атомом заліза (II). p align="justify"> При дії на гемоглобін концентрованої оцтової кислоти в присутності NaCl гем переходить в гемин, в якому залізо тривалентне і його третя валентність пов'язана з хлором. При дії на гемоглобін лугів гем переходить в гематин, в якому атом заліза також трьохвалентний, і третя його валентність пов'язана з гідроксильною групою. p align="justify"> Гем, що входить до гемоглобін, прискорює реакцію окислення субстратів (S В· H2) пероксидом водню, тобто діє подібно ферменту пероксидази: S В· H2 + H2O2 - S + 2H2O. Це пояснюється подібністю будівлі простетичної груп гемоглобіну і пероксидази. Однак на відміну від ферменту гемоглобін зберігає каталітичні властивості при кип'ятінні і дії сильних кислот, які викликають денатурацію білка. p align="justify"> Якщо в досліджуваному матеріалі міститься кров, то її присутність можна виявити по здатності гемінової групи каталізувати окислення підходящих субстратів (бензидин, гвояковая смола) пероксидом водню.
Реактиви. Пероксид водню, 3%-ний свіжоприготований розчин; бензидин, 5%-ний свіжоприготований розчин в крижаній оцтової кислоти; гваяковая смоляная кислота, 1%-ний розчин на 95%-ном етиловому спирті, свіжоприготований; азотна кислота, конц.; Соляна кислота , яка не містить заліза, 10%-ний розчин; гексаціаноферрат (II) калію, 2,5%-ний розчин; роданід амонію, 1%-ний розчин; гідроксид натрію, 3%-ний розчин; біуретового реактив *; ацетон, підкислений соляною кислотою (3 мл 2 М розчину HCl на 1 л ацетону, рН? 2), охолоджений в холодильнику.
Обладнання. Смужки фільтрувального паперу шириною 1 см; очні піпетки; піпетки місткістю 1 і 10 мл; штатив; прості і центрифужні пробірки; водяна і піщана лазні; центрифуга з Центрифужна вагами; тигель фарфоровий і тигельні щипці. p align="justify"> Матеріал.
Цілісна кров, розведена в 5000 разів дистильованою водою.
Кров дефібринованої.
Гемоглобін кристалічний, 1%-ний водний розчин.
а. Бензідіновая проба на геміновую групу гемоглобіну. Метод заснований на здатності гемінової групи гемоглобіну каталізувати реакцію окислення бензидина в діфенохінондіімін пероксидом водню
В
Діфенохінондіімін конденсується з молекулою неокисл...
